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產品名稱：RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)

規格：5×106cells

貨號：YS-02X9702

產品分類:細胞系

儲存條件2℃-8℃，避光儲存

運輸條件冰袋冷藏運輸

注意事項

1、使用產品時應注意無菌操作，避免污染。

2、本產品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

3、為保持本產品的最佳使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環境中。

4、所有產品請于保質期內使用，超出保質期，必須放棄使用。

5、本產品只供進一步科研使用，不可應用于臨床等其他方面。

 

實驗材料：

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶

2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞

3、50ml離心筒2個

4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個

6、細胞計數板1塊；

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；

8、酒精燈1臺；

細胞復蘇步驟：

1：水浴鍋預熱至37℃備用

2：準備15mL離心管，并向其中加入適量培養基待用

3：將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養基重懸細胞，接種至新的無菌培養器皿中

GATA-4  GATA結合4抗體 規格: 0.1ml

Na+/K+-ATPase Alpha1  Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATPα1多肽抗體 規格: 0.2mlFBXW12/FBXO35  FBXW12抗體 規格: 0.2ml

Ensconsin  上皮細胞微管相關7抗體 規格: 0.2mlphospho-c-Raf(Ser462)  磷化原基因c-Raf抗體 規格: 0.1ml

Bax  Bax抗體 規格: 0.1ml

MURF3  肌肉特定環指3抗體 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/FITC  FITC標記的兔抗人IgG F(ab')2  規格: 0.1mlDPH2  白喉酰胺生物合成樣2抗體 規格: 0.2ml

SASH1  瘤抑制基因PEPE1抗體 規格: 0.2ml

CIDEC  細胞死亡活化抗體 規格: 0.2ml

SCAP/SREBF chaperone protein  固調節元件結合裂解激活抗體 規格: 0.2ml

phospho-IL-7Ra(Tyr449)  磷化白細胞介-7受體a抗體 規格: 0.1ml

Sulfatase 2  硫酯2抗體 規格: 0.2ml

RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)74222-97-2甲嘧磺隆;純品型;標準品;有證書 規格： 0.1g

102518-79-6石杉甲 規格： 20mg

107-43-7甜菜 規格： 50mg

16481-54-2鬼臼-4-O-;Podoph 規格： 10mg

4233-96-9沒食子兒茶沒食子酯 規格： HPLC≥98%，20mg/vial

去羥肌 規格： 100mg

3184-13-2L-鳥氨鹽 規格： HPLC≥98%;20mg

3621-38-3藥根 規格： 20mg

84687-43-4黃芪甲 規格： HPLC≥98%,20mg/支

75330-75-5汀 規格： HPLC≥98%;20mg

細胞培養方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。