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IgG2a檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法(ELISA),用于檢測小鼠血清和血漿樣本中IgG2a的測定。僅供研究使用。不是為了在診斷程序中的使用。
作為ALPCO在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品IgG2A(小鼠)ELISA, 96孔。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
IgG2A(小鼠)ELISA, 96孔 | ALP-41-I2AMS-E01 | 查看 |
IgG2A(小鼠)ELISA, 96孔檢測原理:
雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定(ELISA)的原理在圖1中表示。在這種測定中,樣品中存在的IgG2a與已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗IgG2a抗體反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后,加入與辣根過氧化物酶(HRP)結合的抗IgG2a抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的IgG2a形成復合物。經過另一次洗滌步驟后,通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB),測定免疫吸附劑上結合的酶。結合的酶量與測試樣品中IgG2a的濃度直接相關;因此,450納米處的吸光度是測試樣品中IgG2a濃度的量度。測試樣品中IgG2a的量可以從標準曲線中插值得出,并根據樣品稀釋進行校正。
未提供的所需材料
? 精密移液器(2微升至1000微升),用于制備和分發稀釋液
? 試管
? 噴霧瓶或微孔板洗滌器/抽吸器
? 蒸餾水或去離子水
? 微孔板讀取器
? 用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿
? 樣本收集用的離心機
? 血漿收集用的抗凝劑
? 計時器
樣本收集和處理
所有血液成分和生物材料應視為潛在危險。處理和處置時遵循通用預防措施。如果血液樣本出現凝固、嚴重溶血、脂血,或樣本完整性受到質疑,請做記錄并謹慎解釋結果。
以下列出的樣本收集和儲存條件僅供參考。尚未評估樣本穩定性。
? 血清樣本 - 應通過靜脈穿刺收集血液。血凝塊形成后通過離心分離血清。取出血清并立即進行測定或分裝樣本并儲存于-80°C(最好)或-20°C。避免反復凍融循環。
? 血漿樣本 - 應將血液收集到含有抗凝劑的容器中,然后進行離心。立即進行測定或分裝樣本并儲存于-80°C(最好)或-20°C。避免反復凍融循環。
? 已知干擾物質 - 濃度高于0.1%的氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。
樣本稀釋
測定要求在測試前對每個測試樣本進行稀釋。每次進行測定時,所有樣本都應以雙份進行測定。推薦的稀釋只是建議。稀釋應基于未知樣本的預期濃度,使稀釋后的樣本落在標準曲線的動態范圍內。如果不確定樣本水平,在運行整個板之前,強烈建議對一個或兩個代表性樣本進行系列稀釋。
? 血清和血漿樣本 - 推薦的起始稀釋為1:50,000。要準備1:50,000的樣本稀釋,將5微升的樣本轉移到995微升的1倍稀釋液中。這給出1:200的稀釋。接下來,將1:200的樣本通過轉移4微升到996微升的1倍稀釋液中進行稀釋。這產生1:50,000的樣本稀釋。在每個階段c底混合。
結果計算
從每個孔的測試值中減去平均背景值(標準零的平均吸光度讀數)。
平均每個標準品的雙份讀數,并使用結果構建標準曲線。通過使用能夠生成4參數邏輯曲線擬合的計算機軟件來減少數據來構建標準曲線。也可以使用二階多項式(二次)或其他曲線擬合;然而,它們對數據的擬合將不夠精確。
從標準曲線中插值得到測試樣本值。校正血清稀釋因子,得出原始樣本中IgG2a的濃度。
ALPCO產品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。
作為ALPCO在中國區域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。
IgG2A(小鼠)ELISA 96孔試劑盒IgG2A(小鼠)ELISA 96孔試劑盒
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