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今天一起來聊聊孕馬血清促性腺激素。
PMSG是從妊娠母馬血清中提取的一種復合糖蛋白。垂體前葉細胞和垂體前葉細胞中的kda-63可作為刺激卵泡的補充蛋白。因此,PMSG-Intervet刺激女性卵泡發育。
PMSG激素是一種*的激素,在人工授精前與孕激素一起用于增加排卵。PMSG激素是從懷孕母馬的血清中產生的胎盤糖蛋白。PMSG由alfa亞基和β亞基組成。PMSG激素是從妊娠母馬子宮內膜杯中分泌出來的激素,它在40~130天內逐漸成熟,一旦提取出來,就可以用來促進雌性動物的人工發情。這些組合產生PMSG激素來誘導母馬的卵巢和卵巢再生結構。PMSG可通過卵巢誘導卵泡的生長并導致排卵。
PMSG激素在馬以外的物種中有大約4天的生物活性半衰期。延長的生物活性可以引起卵巢刺激和排卵。然而,單獨使用PMSG通常會導致囊性卵巢疾病,因為不受限制的卵巢刺激和糖分子降低激素的清除率。由于循環半衰期延長,PMSG比其他垂體激素更有可能被使用。PMSG僅具有促黃體生成激素樣活性,但在其他動物類中,PMSG具有FSH和LH樣活性。
一、影響因素
影響PMSG分泌量的因素與妊娠時期、動物種類、個體和胎兒遺傳型有關:
①妊娠時期與PMSG在血液中出現,含量多少以及消失都有一定的規律,這種規律與子宮內膜杯的出現、增長和消失是一致的。母馬于妊娠37~40天出現PMSG,55~75天時分泌量達高峰,以后下降,120~150天消失。
②動物個體不同,分泌量有所差異。妊娠母馬個體間PMSG的分泌量在每ml血清中可由10單位到250單位。分析原因是子宮內膜杯的數目叢不同,產生PMSG的多少也不同;懷雙胎時比懷單胎產量增加1倍;體格大小不同,PMSG血中的相對濃度會有差異,輕型馬比重型馬濃度高;子宮內膜杯消失的快慢也是造成個體間差異的原因。
③胎兒的遺傳型,即胎兒的基因型不同,PMSG的產量不同。經研究證實,胎兒的遺傳型是影響PMSG分泌量突出的因子。驢懷騾分泌高,馬懷馬次之,馬懷騾再次之,驢懷驢低。
二、化學特性
PMSG也是一種糖蛋白激素,其特點是含糖量高,約占41~45%,而且唾液酸含量多,因而形成了PMSG的酸性特點,故在血液中的半衰期可長達40—120小時。
PMSG分子與垂體促性腺激素一樣,也是由α和β亞單位組成,而β亞單位是表現其活性的主要部分。其分子量為53000。由于分子不夠穩定,高溫、酸、堿條件都易引起失效,同時對它的分離提純工作也較其他糖蛋白激素困難,但是通過研究其肽鏈的編碼DNA,已經推出其α、β兩亞基的氨基酸順序。
三、應用
PMSG是一種經濟實用的促性腺激素。在生產上常用以代替較昂貴的FSH而廣泛應用于動物的誘發發情、超數排卵或增加排卵率(如提高雙羔率);對卵巢發育不全或雄性生精能力衰退等也都可收到一定療效。其應用方法和常用劑量列于表2—4。
應該提出的是,在實踐中進行誘發發情或超數排卵處理時,發現動物個體對PMSG的反應性差異很大,有的個體甚至沒有反應。其原因比較復雜,是否與個體生理狀態不同,或者不同個體產生不同程度的免疫性反應所致,尚有待進一步探討。
四、孕馬全血、孕馬血清制備或提取孕馬血清促性腺激素的方法
1.孕馬全血的制備 取500ml玻璃瓶,加入硼砂10g、硫代硫酸鈉5g及蒸餾水30ml,在蒸鍋中滅菌。冷卻至體溫時,采血500ml。在采血過程中,要搖晃瓶子,以防血液凝固。用滅菌翻口橡皮塞封好,放陰涼處備用。在普通冰箱內可保存1年以上。
2.孕馬血清的制備 選懷孕50-120天的健康母馬,是輕型馬,由頸靜脈采血于滅菌、干燥的筒狀容器內,于室溫中使血液凝固,析出血清(為了得到更多的血清,可在凝固的血液上加上較重的物體)。吸出血清,加入0.5%石炭酸,保存于冷暗處,有效期可達1年左右。
3.PMSG的提純 選懷孕50—90天的的母馬,用無菌手續采血,使自然凝固,分離血清,并加入0.5%石炭酸防腐,保存于4℃冰箱中備用。
提純時,以偏磷酸沉淀蛋白,以苯甲酸吸附孕馬促性腺激素,并以酒精加以沉淀。
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