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中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL,Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin)是一種由LCN2基因編碼的蛋白質(zhì),廣泛存在于中性粒細(xì)胞、腎臟、前列腺、呼吸道和消化道的上皮細(xì)胞中。NGAL在多種病理?xiàng)l件下顯著升高,尤其是在急性腎損傷(AKI)和慢性腎臟病中,NGAL水平與疾病的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。因此,NGAL已成為一種重要的生物標(biāo)志物,用于早期診斷和監(jiān)測(cè)腎臟損傷。
艾美捷NGAL樣本采集試劑盒【#43-NGALEX-50】的檢測(cè)原理:
NGAL樣本采集試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,具體步驟如下:
樣本處理:將樣本加入預(yù)先包被有抗NGAL抗體的微孔板中。
孵育:樣本中的NGAL與包被抗體結(jié)合,未結(jié)合的成分通過(guò)洗滌去除。
加入檢測(cè)抗體:加入生物素標(biāo)記的抗NGAL抗體,形成“抗體-NGAL-抗體"夾心復(fù)合物。
加入酶標(biāo)記物:加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素,與生物素結(jié)合。
顯色反應(yīng):加入顯色底物TMB,HRP催化TMB氧化生成藍(lán)色產(chǎn)物,加入終止液后變?yōu)辄S色。
結(jié)果讀取:在450 nm處測(cè)量吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中NGAL的濃度。
NGAL樣本采集試劑盒的應(yīng)用:
急性腎損傷(AKI)的早期診斷:NGAL在腎小管損傷后2小時(shí)內(nèi)迅速升高,可在血液和尿液中檢測(cè)到,是AKI的早期生物標(biāo)志物。
慢性腎臟病的監(jiān)測(cè):NGAL水平與慢性腎臟病的進(jìn)展密切相關(guān),可用于監(jiān)測(cè)疾病進(jìn)展和評(píng)估治療效果。
炎癥和感染研究:NGAL在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用,可用于研究炎癥相關(guān)疾病。
臨床研究和藥物開(kāi)發(fā):用于評(píng)估藥物對(duì)腎臟損傷的保護(hù)作用。
特性:
高靈敏度:可檢測(cè)低至4 pg/mL的NGAL。
快速檢測(cè):96孔板設(shè)計(jì),4小時(shí)內(nèi)可完成最多40個(gè)樣本的檢測(cè)。
全定量分析:提供全定量結(jié)果,優(yōu)于半定量的免疫印跡法。
即用型預(yù)涂板:試劑盒包含預(yù)涂有抗體的微孔板和獨(dú)立標(biāo)準(zhǔn)溶液,節(jié)省時(shí)間并減少操作失誤。
廣泛的樣本類型:適用于血清、血漿、尿液、組織提取物和細(xì)胞培養(yǎng)上清液。
樣本采集與處理:
樣本類型:適用于人和動(dòng)物的血清、血漿、尿液等生物樣本。
樣本處理:樣本采集后應(yīng)盡快處理,避免長(zhǎng)時(shí)間存放。如需保存,建議在-20℃或更低溫度下保存。
稀釋與復(fù)溶:根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行樣本稀釋和標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶,確保樣本濃度在檢測(cè)范圍內(nèi)。
結(jié)果解讀:
標(biāo)準(zhǔn)曲線:通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣本中NGAL的濃度。
稀釋校正:如果樣本濃度超出檢測(cè)范圍,需進(jìn)行稀釋后重新檢測(cè),并根據(jù)稀釋倍數(shù)校正結(jié)果。
質(zhì)量控制:試劑盒提供質(zhì)控品,用于驗(yàn)證檢測(cè)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。
NGAL樣本采集試劑盒是一種高效、靈敏的檢測(cè)工具,適用于多種樣本類型的NGAL檢測(cè)。其廣泛的應(yīng)用范圍和便捷的操作流程,使其成為研究和臨床診斷中重要的工具。
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