組蛋白3(H3)位于細胞核中,并入染色質。與H2A、H2B和H4一起存在于核小體中。
艾美捷H3|組蛋白H3(兔抗體)(核標記):
貨號:AS10-710
免疫原:與KLH偶聯的合成肽,源自已知的H3序列,包括擬南芥H3.3(P59169,基因編號At4g40030、At4g40040、At5g10980)、H3.2(P59226,基因編號At1g09200、At3g27360、At5g10390、At5g10400、At5g65360)和H3-like 2(Q9FXI7,基因編號At1g19890)
宿主:兔
克隆性:多克隆
純度:血清
形式:凍干粉
數量:50 µl
復溶方法:復溶時加入50 µl無菌水
儲存條件:凍干粉/復溶后于-20°C保存;復溶后請分裝,避免反復凍融。打開管子前請短暫離心,以避免因材料粘附在蓋子或管壁上而導致的損失。
額外信息:細胞核(核質)標記物,適用于萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)的染色質免疫沉淀-定量PCR(ChIP-qPCR)的加載對照抗體。
推薦稀釋度:1:100-1:500(免疫細胞化學),ChIP-qPCR每500 µl溶液中使用2 µl抗體,1:500(免疫熒光),1:5000(Western Blot)
預期/表觀分子量:15 | 17 kDa
已確認的反應性:擬南芥、灰霉病菌、甘藍、辣椒、茜草素、衣藻嗜酸菌、萊茵衣藻、蘇育黃瓜、柱狀西葫蘆、大麥
庸俗、人類、煙草屬、蝴蝶蘭、三角褐指藻、斑毛藻,鹽角草屬植物、番茄、茄、馬鈴薯、蠶豆、玉米
預測的反應性:雙莖苞葉螟、甘藍型油菜、胡枝子、苦蕎麥。,甘氨酸max,微綠球藻、煙草、蘋果、苜蓿、水稻、Ostreococcus sp。松、豌豆、紫球藻、甘蔗、高粱、小麥、葡萄葡萄,Volvox sp。
未反應的生物:目前尚未發現與預測反應性不符的已確認例外情況
額外信息:在免疫細胞化學(ICC)中,已觀察到中期核以及有絲分裂染色體的著絲粒區域(組蛋白H3的Ser10位點發生磷酸化)有特異性熒光。
應用實例:
圖:從擬南芥中提取的1.2 µg染色質富集組分(1)和4周齡擬南芥葉片中的3.75 µg總蛋白(2),在12%的SDS-PAGE上分離后,轉印至Immobilon-P(Millipore,半干法)PVDF膜,轉印時間為50分鐘。轉印后,膜立即用MTBS-T(5%脫脂奶粉)在室溫下封閉30分鐘,期間不斷攪拌。膜在1:5000稀釋的一抗中孵育1小時,室溫下攪拌。棄去一抗溶液后,膜短暫沖洗兩次,然后在室溫下用TBS-T洗滌3次,每次3分鐘,期間不斷攪拌。膜在二抗(抗IgG辣根過氧化物酶偶聯抗體,Agrisera,AS09 602,稀釋至1:20,000)中孵育30分鐘,室溫下攪拌。膜按上述方法洗滌后,用ECL檢測試劑顯色5分鐘,按照制造商的說明進行操作。曝光時間為30秒。染色質富集組分(1)中出現的雙條帶在肽中和實驗中被用于誘導H3抗體的肽所競爭。染色質分離按照Zilberman等(2008)的描述進行,略有修改。
感謝Weronika Sura和Adam Mickiewicz大學生物技術系的Piotr A. Ziolkowski博士,波蘭波茲南。
H3|組蛋白H3(兔抗體)(核標記)文獻參考:
Martín-Merchán et al. (2024). Arabidopsis AGO1 N-terminal extension acts as an essential hub for PRMT5 interaction and post-translational modifications. Nucleic Acids Res . 2024 May 20:gkae387.doi: 10.1093/nar/gkae387.
Mosesso et al. (2024). Arabidopsis CaLB1 undergoes phase separation with the ESCRT protein ALIX and modulates autophagosome maturation. Nat Commun. 2024 Jun 19;15(1):5188. doi: 10.1038/s41467-024-49485-6.
Nguyen et al.(2024). The processed C-terminus of AvrRps4 effector suppresses plant immunity via targeting multiple WRKYs.J Integr Plant Biol. 2024 Jun 13.doi: 10.1111/jipb.13710.
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