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Pimonidazole HCl,作為一種重要的缺氧標記物,已被廣泛用于生物醫(yī)學研究,尤其是在腫瘤學領域。它是一種2-硝基咪唑類化合物,能夠通過特定的化學反應,幫助科學家們在細胞和組織水平上評估缺氧狀態(tài)。
艾美捷Pimonidazole HCl(HPB-HP-1000mg)缺氧研究的關鍵角色:
Pimonidazole HCl在缺氧細胞中被還原激活,并與蛋白質(zhì)、肽和氨基酸中的巰基基團形成穩(wěn)定的加合物。這一特性使得Pimonidazole HCl成為檢測缺氧環(huán)境的理想工具。通過免疫組化檢測Pimonidazole HCl的加合物,研究者可以在光學顯微鏡下定性評估缺氧和細胞增殖,并使用圖像分析軟件方法進行定量評估。
應用范圍廣泛:
Pimonidazole HCl的應用不僅限于基礎科研,它還在臨床試驗中發(fā)揮作用。例如,在乳腺癌腫瘤模型中,Pimonidazole HCl的質(zhì)譜成像技術被用來研究缺氧標記物。此外,Pimonidazole HCl的結合與腫瘤血管形成被用來預測頭頸癌的治療結果。這些研究表明,Pimonidazole HCl不僅在實驗室研究中有用,也可能在臨床實踐中提供重要的診斷和預后信息。
使用指南:
通常涉及以下幾個步驟:
溶解:將Pimonidazole HCl溶解在適當?shù)娜軇┲校缟睇}水或PBS,以制備所需濃度的工作溶液。
給藥:通過靜脈注射或腹腔注射的方式將Pimonidazole HCl引入實驗動物體內(nèi)。對于小鼠,推薦的劑量通常是每公斤體重60毫克,這個劑量被認為是經(jīng)濟有效的。
組織收獲:在給藥后的一定時間(通常為15-120分鐘)后,收獲感興趣的組織。這個時間窗口允許Pimonidazole HCl在缺氧細胞中被還原并形成加合物。
組織處理:收獲的組織可以進行固定、包埋和切片,以便于后續(xù)的免疫組織化學染色。
免疫檢測:使用特異性抗體檢測Pimonidazole HCl的加合物。這可以通過免疫熒光、免疫組化或Western blotting等方法實現(xiàn)。
結果分析:通過顯微鏡觀察或圖像分析軟件,對缺氧細胞的分布和數(shù)量進行定性和定量分析。
注意事項:
Pimonidazole HCl的穩(wěn)定性較好,固態(tài)探針在4°C或常溫下性質(zhì)穩(wěn)定,可以保存數(shù)年。高濃度的探針水溶液在避光4°C條件下也可以保存數(shù)年。
在使用Pimonidazole HCl時,需要注意其在體內(nèi)的分布和代謝。Pimonidazole HCl的血漿半衰期在小鼠中約為15-25分鐘,這意味著在組織收獲時,大部分探針已經(jīng)被清除,從而減少了非特異性染色。
對于不同的實驗動物,Pimonidazole HCl的劑量可能需要調(diào)整。例如,對于人類樣本,推薦的劑量為0.5克/平方米,而對于狗則為0.28克/平方米。
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