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鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8自身抗體在1型糖尿病鑒別和特征識(shí)別中的作用
閱讀：4121 發(fā)布時(shí)間：2022-5-23針對胰島素、谷氨酸脫羧酶（GAD）、蛋白酪氨酸磷酸酶（IA-2）和鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8（ZnT8）等的抗胰島相關(guān)自身抗體是診斷、預(yù)測和鑒別1型糖尿病臨床表型的重要生物學(xué)標(biāo)志物。其中谷氨酸脫羧酶自身抗體（GADA）檢測是診斷自身免疫性糖尿病常用的方法。先前的研究報(bào)道，鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8自身抗體（ZnT8A）與1型糖尿病的急性起病和兒童期發(fā)病患者相關(guān)，因此被認(rèn)為是自身免疫介導(dǎo)的β細(xì)胞破壞的一個(gè)更特異的標(biāo)志物。
ZnT8A是新近被廣泛研究的一種T1DM自身免疫的胰島自身抗體靶標(biāo)，可在66%–80%的白種人患者中檢測到，并且在大約26%的先前被歸類為自身抗體陰性的T1DM患者中被檢測到。在年輕的TIDM患者中，ZnT8A可能與急性疾病發(fā)作和酮癥酸中毒有關(guān)。檢測ZnT8A有助于排除年青的成年發(fā)病型糖尿病（MODY），在具有顯著內(nèi)源性胰島素分泌的個(gè)體中檢出額外18%的可能T1DM（與單獨(dú)的GADA和蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗體(IA-2A)相比）。
橋式酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法（RSR Limited獨(dú)jia）在胰島自身抗體標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目或糖尿病抗體標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目中獲得了較高的靈敏度和特異性，本研究旨在探討ZnT8A在日本人群自身免疫介導(dǎo)的1型糖尿病的鑒定和特征識(shí)別中的意義。
檢測方法：
應(yīng)用橋式酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（RSR Ltd.，Cardiff，UK）檢測ZnT8A，GADA和IA-2A。
檢測樣本：
來自日本7家醫(yī)院的日本裔受試者，具體疾病分型和入組人數(shù)如下：
結(jié)果
日本人群中ZnT8A臨界值的建立
表1總結(jié)了288名健康對照組的ZnT8A結(jié)果，并與制造商(RSR Ltd.，n = 297)的結(jié)果進(jìn)行了比較。288例健康對照組ZnT8A的平均水平為3.8±2.3 U/mL，中位水平為3.7 U/mL(范圍，0.0 - 28.0 U/mL)。雖然平均和中位水平高于RSR正常對照組，但由于SD值較小(2.3 U/mL)，故平均+ 3SD (10.7 U/mL)和第99百分位(9.6 U/mL)低于RSR對照組。因此，我們將日本人群的臨界值設(shè)置為10.0 U/mL。根據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)，288名健康對照組中有3名(1.0%)ZnT8A濃度為11.3、13.4和28.0 U/mL，且這些參與者均未發(fā)現(xiàn)GADA或IA-2A陽性。
ZnT8A陽性檢出率和水平分布
本研究顯示，ZnT8A在急性起病1型糖尿病患者中的檢出率明顯高于緩慢進(jìn)展或暴發(fā)性1型糖尿病患者（P<0.05）。
圖1 1型糖尿病患者（急性起病、暴發(fā)性、緩慢進(jìn)展）、2型糖尿病患者和健康對照組中的 ZnT8A濃度
Kawasaki等人此前報(bào)道，使用放射配體結(jié)合法檢測暴發(fā)性1型糖尿病患者中ZnT8A的陽性檢出率，結(jié)果為0。雖然本研究中能夠檢測到2例ZnT8A陽性的暴發(fā)性1型糖尿病患者，但這2例患者的ZnT8A水平分別為11.7和14.0 U/mL，低于廠商臨界值，這表明暴發(fā)性1型糖尿病患者對ZnT8分子基本沒有體液自身反應(yīng)。這些結(jié)果與之前的研究一致，ZnT8A反映了自身免疫介導(dǎo)的β細(xì)胞破壞。而暴發(fā)性1型糖尿病的主要病因是病毒感染β細(xì)胞后的先天免疫，非自身免疫機(jī)制。
ZnT8A與1型糖尿病病程的關(guān)系
文章研究了急性起病和緩慢進(jìn)展1型糖尿病患者的ZnT8A陽性檢出率與糖尿病病程之間的關(guān)系（圖3）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著糖尿病持續(xù)時(shí)間的延長，三組患者ZnT8A的陽性檢出率均有所下降（37.7、28.6和15.3%；P<0.001；圖3a）。同時(shí)觀察到ZnT8A水平與病程呈顯著負(fù)相關(guān)（r= -0.350，P<0.001；圖3b）。
圖3 ZnT8A陽性或水平與急性起病和緩慢進(jìn)展1型糖尿病患者糖尿病病程的相關(guān)性
ZnT8A、GADA和IA-2A的聯(lián)合分析
文章進(jìn)一步分析了118例病程在5年內(nèi)的1型糖尿病患者（急性起病和緩慢進(jìn)展）的采樣年齡與GADA和/或ZnT8A陽性檢出率之間的關(guān)系。
發(fā)現(xiàn)ZnT8A在≤10歲患者中的陽性檢出率(52.9%)明顯高于其他年齡組（P<0.05）。此外，與年齡≥11歲的患者(3.6%，3/84)相比，額外檢測GADA增加了≤10歲患者(11.7%，4/34)的診斷靈敏度（表4）。因此推薦年齡≤10歲患者進(jìn)行GADA和ZnT8A聯(lián)合檢測。
此外，通過多變量logistic回歸分析評估了ZnT8A的存在與臨床及免疫學(xué)參數(shù)的關(guān)系。在此過程中，根據(jù)受試者工作特征曲線，研究者發(fā)現(xiàn)采樣年齡的最佳截止點(diǎn)為11歲（靈敏度46.3%，特異性77.9%）。ZnT8A的存在與性別、持續(xù)時(shí)間和GADA的存在無相關(guān)性。然而，ZnT8A陽性與更小的發(fā)病年齡(OR=2.64, 95%CI 1.00-6.97, P = 0.049)和IA-2A的存在(OR=2.97, 95%CI 1.24-7.12, P = 0.015)相關(guān)（表5）。
表4 發(fā)病時(shí)間≤5年的急性起病和緩慢進(jìn)展1型糖尿病患者的GADA和ZnT8A的存在與年齡的關(guān)系
表5 Logistic回歸分析 發(fā)病時(shí)間≤5年的急性起病和緩慢進(jìn)展的1型糖尿病患者臨床和免疫學(xué)參數(shù)與ZnT8A陽性的相關(guān)性
本研究中展示了以下關(guān)鍵因素的證據(jù)：
24.7%的1型糖尿病患者和5.2%的2型糖尿病患者的ZnT8A陽性（自建臨界值，10 U/mL）。
急性起病1型糖尿病患者和≤10歲的患者ZnT8A的陽性檢出率較高。
在ZnT8A陽性患者中，ZnT8A水平與病程呈顯著負(fù)相關(guān)。
ZnT8A陽性與采樣時(shí)的年齡和IA-2A陽性相關(guān)。
參考文獻(xiàn)：
Kawasaki E, Oikawa Y, Okada A, Kanatsuna N, Kawamura T, Kikuchi T, Terasaki J, Miura J, Ito Y, Hanafusa T. Zinc transporter 8 autoantibodies complement glutamic acid decarboxylase and insulinoma-associated antigen-2 autoantibodies in the identification and characterization of Japanese type 1 diabetes. J Diabetes Investig. 2020 Sep;11(5):1181-1187.
Grace SL, Cooper A, Jones AG, McDonald TJ. Zinc transporter 8 autoantibody testing requires age-related cut-offs. BMJ Open Diabetes Res Care. 2021 Aug;9(1):e002296.