詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 副百日咳波氏桿菌PCR檢測試劑盒 |
英文名稱 | Bordetella parapertussisPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
ein C-I,APOC1 ELISA kit
人載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA Kit Human Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit
人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA Kit Human apo-A5 ELISA Kit
人載脂蛋白A4(Apo-A4)ELISA Kit Human Apo-A4 ELISA Kit
人載脂蛋白A2(apo-A2)ELISA Kit Human Apolipoprotein A2,apo-A2 ELISA Kit
人載脂蛋白A1(Apo-A1)抗體 ELISA Kit Human anti-apolipoprotein A1(Apo-A1)antibody ELISA Kit
人運(yùn)甲狀腺素蛋白/前白
GM)ELISA試劑盒
卵黃狀黃斑病蛋白2抗體 CIP2A ELISA Kit 磷酸酶PP2A癌性抑制物(CIP2A)ELISA試劑盒
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SAD-B抗體 PGK1 ELISA Kit 磷酸激酶1(PGK1)ELISA試劑盒
鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體 PI3K ELISA Kit 磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
腦肌酸激酶BCK抗體 PaCoA ELISA Kit 磷酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒
β葡萄糖醛酸苷酶抗體 pAMPK ELISA Kit 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒
乳腺癌相關(guān)蛋白1抗體 AMPK ELISA Kit 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒
副百日咳波氏桿菌PCR檢測試劑盒Bcl2樣凋亡蛋白9抗體 pERK ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELIS
蛋白(TTR)ELISA Kit Human TTR ELISA Kit
人孕烯醇酮(PREG)ELISA Kit Human pregnenolone,PREG ELISA kit
人孕酮受體(PGR)ELISA Kit Human PGR ELISA Kit
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過擴(kuò)增曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動(dòng)化程度高、無污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實(shí)現(xiàn)對(duì)PCR進(jìn)行定量檢測。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,嚴(yán)格針對(duì)特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。