背景資料:Simian Rotavirus VP4 (Outer Capsid protein VP4) (Hemagglutinin) functions as a spike-forming protein that mediates virion attachment to the host epithelial cell receptors and plays a major role in cell penetration, determination of host range restriction and virulence. Rotavirus entry into the host cell probably involves multiple sequential contacts between the outer capsid proteins VP4 and VP7, and the cell receptors. According to the considered strain, VP4 seems to essentially target sialic acid and/or the integrin heterodimer ITGA2/ITGB1. VP4 is a homotrimer and adopts a dimeric appearance above the capsid surface, while forming a trimeric base anchored inside the capsid layer.
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
Rotavirus A VP4抗體 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
產(chǎn)品分類:抗體 / 一抗
英文名稱:Rotavirus A VP4
中文名稱 輪狀病毒 (RVA) VP4抗體
英文別名 RVA; Hemagglutinin; VP4_ROTSS; Outer Capsid protein VP4 (Hemagglutinin); Outer capsid protein VP4; RVA s4gp1; RVAs4gp1; RVA VP4; Outer capsid protein VP4; Simian Rotavirus VP4; VP4_ROTRH; Outer capsid protein VP5*; Outer capsid protein VP8*; 中文別名 輪狀病毒(Rotavirus A);
標(biāo)記: Unconjugated
抗體來源: Rabbit
抗體類型: Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from Simian Rotavirus VP4
純化方法: Affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
研究領(lǐng)域: 細(xì)胞生物 細(xì)菌及病毒
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。
相關(guān)產(chǎn)品:
脫氧核糖核酸酶γ抗體 Anti-DNase gamma 100ul
Duffy血型趨化因子受體抗體 Anti-DARC 100ul
雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體 Anti-DPF2 100ul
軸絲中鏈動力蛋白抗體 Anti-DNAI1 + 2 100ul
磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體 Anti-phospho-DAB2 100ul
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
標(biāo)記法:
直接標(biāo)記法 | 間接標(biāo)記法 |
抗體的準(zhǔn)備:取提純的Ig溶液測定蛋白質(zhì)含量,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,冰槽中攪拌5~10min; 熒光素的準(zhǔn)備:按每毫克蛋白質(zhì)加0.01~0.02mg的FITC計(jì)算,準(zhǔn)確稱取后加入抗體溶液中; 標(biāo)記:邊攪拌邊加入熒光素,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰庫繼續(xù)攪拌12~18h; 透析:結(jié)合完畢后,先將結(jié)合物以3000r/min離心20min,除去少量沉淀物后裝入透析袋中再置于pH8.0緩沖鹽的燒杯中透析過夜; 過柱:取透析過夜的標(biāo)記物,過葡聚糖凝膠G-25或G-50柱,分離游 | 抗體的準(zhǔn)備:0~4℃下,用0.01mol/L pH8.0 PBS將待標(biāo)記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,置于三角燒瓶內(nèi)放入冰槽中; 熒光素的準(zhǔn)備:按每毫克蛋白質(zhì)加入0.01mg的熒光素稱取,溶解于等量的3%重碳酸鈉水溶液中;將抗體蛋白溶液與FITC溶液等量混合,在0~4℃中攪拌18~24h,充分?jǐn)噭颍?span> 透析或過柱層析。 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
Sidekick 2: 細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白2抗體 0.2ml
Engrailed 1: 同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體 0.2ml
壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 Anti-TRAF2 0.2ml
Anti-TP I /FITC 熒光素標(biāo)記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ITGB3(Tyr773) 0酸化整合素β3抗體 規(guī)格 0.1ml
BRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat) 癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠鎖鏈素(Desmosine)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,Desmosine ELISA Kit
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA檢測試劑盒Mousemacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAkit 96T/48T
人(GSH)免疫試劑盒 Human glathione,GSH ELISA Kit
RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199酶聯(lián)免疫試劑盒
APC蛋白標(biāo)記試劑盒1次(1毫克/次)
MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgG酶聯(lián)免疫試劑盒小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)酶聯(lián)免疫試劑盒
Rotavirus A VP4抗體塞皮克病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Sepik VirusRTPCR 50T
乳突類圓線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Strongyloides papillosusPCR 50T
肉芽腫性曼氏桿菌病PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mannheimia granulomatisPCR 50T
溶組織梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Clostridium histolyticumPCR 50T
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。