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背景資料：卵黃蛋白原（VTG）是檢測外源性化合物雌激素效應的敏感分子生物標志物，作為生物標志物可以很好地評價環境水體中污染物雌激素效應。 卵黃蛋白原（Vitelloin，VTG)是由卵生脊椎動物肝細胞合成的一種復雜大分子蛋白，是由雌激素誘導在肝臟中表達的脂蛋白—卵黃蛋白的前體。成熟雌魚在體內雌激素17β-雌二醇的刺激下由肝臟合成，經過血液運輸到達卵巢并加工成卵黃蛋白。雄魚在正常情況下不合成這種蛋白，但受到雌激素（內源或外源）刺激也可合成這種蛋白，由于沒有卵巢有效地清除VTG，雄魚血液中VTG

產品分類：抗體 / 一抗

英文名稱：VTG

中文名稱 魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體

英文別名 vitelloin.

標記： Unconjugated

抗體來源： Rabbit

抗體類型： Polyclonal

免疫原 VTG protein
純化方法： Affinity purified by Protein A

亞型 IgG

性狀： Liquid

濃度： 1mg/ml

儲存液： 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件： Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

研究領域： 細胞生物 免疫學

濃度：會升高。因此，通過檢測VTG含

抗體制備過程：
1.材料與試劑
a．提取的動物 Ig
b．弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d．實驗動物 兔
e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。
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抗體的制備過程：

1.免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。

2.免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3.免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4.免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。

5.免疫血清的保存：抗體一般比較穩定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。

標記法：

實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，10min后棄去，使標本保持一定濕度。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間（參考：30min）。
③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不時振蕩。
④ 取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度，一般可用“+"表示：
（-）無熒光；（±）極弱的可疑熒光；（+）熒光較弱，但清楚可見；（++）熒光明亮；（+++ --++++）熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上，而各種對照顯示為（±）或（-），即可判定為陽性。
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