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P4HA1抗體

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更新時間:2023-03-21 10:52:38瀏覽次數:137

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50ul 100ul 200ul
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 P4HA1
濃度 1mg/ml 保存條件 Shipped?at?4℃.?Store?at?-20?°C
品牌 谷研    
P4HA1抗體公司正在出售的產品;地衣形芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bacillus licheniformisPCR
點狀古柏線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cooperia pectinataPCR
東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Eastern Equine Encephalomyelitis Virus(EEEV )RTPCR
東方蜜蜂微孢子蟲PCR檢測試劑盒

詳細介紹

公司專業供應的抗體,是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,價格實惠,多種規格供應,售后完善。

產品名稱

規格

保存條件

P4HA1抗體

50ul 100ul 200ul

Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year.

產品分類:抗體 / 一抗

英文名稱:P4HA1

交叉反應:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

標記: Unconjugated

抗體來源: Mouse

抗體類型: Monoclonal

克隆號: E12H5

蛋白細胞定位: 細胞膜
純化方法: Affinity purified by Protein G

性狀: Liquid

濃度: 1mg/ml

儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件: Shipped at 4. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料
催化膠原蛋白和其他蛋白質中4-in-Xaa-Pro-Gly-序列的翻譯后形成。
抗體制備過程:
1.
材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。

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1.png

2.png


抗體的制備過程:

1.

免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSAOVAHAS等。

2.

免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3.

免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4.

免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。

5.

免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80-20 可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
標記法:



直接標記法

間接標記法

抗體的準備:取提純的Ig溶液測定蛋白質含量,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,冰槽中攪拌5~10min


熒光素的準備:按每毫克蛋白質加0.01~0.02mgFITC計算,準確稱取后加入抗體溶液中;


標記:邊攪拌邊加入熒光素,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰庫繼續攪拌12~18h


透析:結合完畢后,先將結合物以3000r/min離心20min,除去少量沉淀物后裝入透析袋中再置于pH8.0緩沖鹽的燒杯中透析過夜;


過柱:取透析過夜的標記物,過葡聚糖凝膠G-25G-50柱,分離游


抗體的準備:0~4℃下,用0.01mol/L   pH8.0 PBS將待標記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,置于三角燒瓶內放入冰槽中;


熒光素的準備:按每毫克蛋白質加入0.01mg的熒光素稱取,溶解于等量的3%重碳酸鈉水溶液中;將抗體蛋白溶液與FITC溶液等量混合,在0~4℃中攪拌18~24h,充分攪勻;


透析或過柱層析。


實驗步驟:
滴加0.01mol/LpH7.4PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。
取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/LpH7.4PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/LpH7.4PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+"表示:
-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
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