細(xì)胞凋亡陽性對照試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：4EBP1 eIF4E結(jié)合蛋白抗體抗壞血 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-4EBP1(Ser64) 化4E結(jié)合蛋白1抗體抗壞血 ≥99.9998% (metals basis)
phospho-4EBP1(Thr37/46) 化4E結(jié)合蛋白1抗體苯 99.7%,無水級
phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70) 化eIF4E結(jié)合蛋白抗體檸

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)英文名稱：TRAF6 ELISA Kit磷化Ack1抗體包裝5g

腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)英文名稱：TNFRSF11A/RANK ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體包裝1g

腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子1(TL1)英文名稱：TL1 ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激β1抗體包裝5g

腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)英文名稱：TNFsR-Ⅱ ELISA Kit磷化間變型淋巴瘤激抗體包裝25g

腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)英文名稱：TNFsR-Ⅰ ELISA Kit磷化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體包裝5g

腫瘤壞死因子β(TNF-β)英文名稱：TNF-β ELISA Kit磷化三磷腺檸檬裂解抗體包裝100ml

腫瘤壞死因子α(TNF-α)英文名稱：TNF-α ELISA Kit磷化ATR抗體包裝25ml

腫瘤壞死因子α(TNFα)英文名稱：TNFα ELISA Kit核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體包裝500ml

腫瘤蛋白p53(TP53)英文名稱：TP53 ELISA Kit天門冬酰連接糖基化11抗體包裝1g

腫瘤標(biāo)志物(CA724)英文名稱：CA724 ELISA Kit衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體包裝1ml

中性粒細(xì)胞明膠相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)英文名稱：NGAL ELISA Kit基糖苷類磷結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g

中性粒細(xì)胞彈性蛋白(NE)英文名稱：NE ELISA Kit唾液糖蛋白受體1抗體包裝25g

脂氧A4(LXA4)英文名稱：LXA4 ELISA Kit芳香基硫酯F抗體包裝5g

脂聯(lián)(ADP)英文名稱：ADP ELISA KitA激錨定蛋白5抗體包裝1mg

脂聯(lián)(Acrp30)英文名稱：Acrp30 ELISA Kit小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體包裝100g

γ2肌動蛋白抗體甘脫氫(GLDC)Infigratinib (BGJ-398; NVP-BGJ398) 是 FGFR 家族的有效抑制劑，抑制 FGFR1，F(xiàn)GFR2，F(xiàn)GFR3 和 FGFR4
細(xì)胞凋亡陽性對照試劑盒棕褐小單孢 2,5-二氨基-4,6-二羥基嘧啶鹽酸鹽1-磷酸鞘氨檢測試劑盒

猴頭 L-(+)-環(huán)己基甘氨酸2,3-二磷酸甘油酸檢測試劑盒

Frigoribacterium 酸倍氯米松2,5寡腺苷酸合成酶檢測試劑盒

大腸桿 Fmoc-D-4-氯苯氨酸2,5寡腺苷酸合成酶2檢測試劑盒

枯草芽胞桿 辣椒堿（合成）20-HETE檢測試劑盒

菊異莖點霉 鹽酸二氟沙星25羥基D檢測試劑盒

蒼黃鏈霉 4-基α-L-吡喃阿拉伯糖苷25羥基D3檢測試劑盒

假單孢 4-羥基苯乙2-硫代噻唑烷-4-羧酸檢測試劑盒

大腸埃希氏 3,5-二氟溴芐3-硝基酪氨酸檢測試劑盒

三葉草根瘤 雙酮-D-甘露糖3型1-磷酸鞘氨受體檢測試劑盒

委內(nèi)瑞拉鏈霉 異龍腦4-羥基壬烯檢測試劑盒

紅色紅曲  葉綠5α還原酶檢測試劑盒

冬蟲夏草 17α-乙炔基雌二5-甲基四氫葉酸檢測試劑盒

莫哈韋芽孢桿 針葉櫻桃提取物5羥基乙酸檢測試劑盒

海洋桿 羥基酪5羥色檢測試劑盒