詳細介紹
產品屬性:
英文名稱:Hoechst Staining Kit
產品規格:100次
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:Hoechst Staining Kit 產品規格:100次 發貨周期:1~3天 本試劑盒提供了一種經典而又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。細胞發生凋亡時,染色質會固縮。所以Hoechst 33258染色后,在熒光顯微鏡下觀察,正常細胞的細胞核呈正常的藍色,而凋亡細胞的細胞核會呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染,顏色有些發白。 試劑盒特點: 1. 只需25分鐘即可完成細胞凋亡檢測的整個過程。 2. 本試劑盒提供了固定液,染色液,及抗熒光淬滅封片液。 3. 本試劑盒對貼壁細胞,懸浮細胞和組織切片均適用。 4. 足夠檢測100個樣品。 試劑盒組份: 固定液————————————50ml Hoechst 33258染色液 —————50ml 抗熒光淬滅封片液 —————— 5ml |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
轉化生長因子β2(TGF-β2)英文名稱:TGF-β2 ELISA Kit載脂蛋白E4抗體包裝25g
轉化生長因子β2(TGFβ2)英文名稱:TGFβ2 ELISA Kit自噬相關基因AMBRA1抗體包裝10mg
轉化生長因子β1(TGF-β1)英文名稱:TGF-β1 ELISA Kit磷化自噬相關蛋白4C抗體包裝50mg
轉化生長因子β(TGFβ1)英文名稱:TGFβ1 ELISA Kit磷化自噬相關蛋白4C抗體包裝25g
轉化生長因子α(TGF-α)英文名稱:TGF-α ELISA Kit磷化凋亡信號調節激1抗體包裝5g
轉化生長因子α(TGFα)英文名稱:TGFα ELISA Kit磷化失調癥蛋白1抗體包裝1g
主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)英文名稱:MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit脊髓小腦失調癥蛋白1抗體包裝5g
主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)英文名稱:MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g
主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)英文名稱:MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit磷化凋亡信號調節激1抗體包裝5g
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TSGF)英文名稱:TSGF ELISA Kit磷化凋亡信號調節激1抗體包裝1g
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TGSF)英文名稱:TGSF ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝5g
腫瘤壞死因子樣細胞凋亡弱誘導因子(TWEAK)英文名稱:TWEAK ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝100g
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體4(TRAIL-R4)英文名稱:TRAIL-R4 ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝25g
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)英文名稱:TRAIL-R3 ELISA Kit乙酰羧化抗體包裝100g
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)英文名稱:TRAIL-R1 ELISA Kit磷化乙酰羧化抗體包裝25g
磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質/α-晶體蛋白b鏈抗體Pim-2原癌基因(PIM2)R406 (free base) is a potent Syk inhibitor with IC50 of 41 nM in a cell-free ass
細胞凋亡染色試劑盒(細胞Hoechst染色)立枯絲核 五-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖1,25二羥基D檢測試劑盒
盤長孢狀盤孢 卡比多巴1,25-二羥基D3檢測試劑盒
紅鬼筆 紫蘇1,3-二磷酸甘油酸檢測試劑盒
伯克霍爾德 鹽酸芬他林1,4,5-三磷酸肌檢測試劑盒
環圈鏈霉 乙酰甲喹1,5-脫水葡萄糖;1,5-脫水山梨檢測試劑盒
青霉 β-煙酰單核苷酸11去氫血栓烷B2檢測試劑盒
阿舒假囊酵母 氟化鍶11脫氫血栓素B2檢測試劑盒
曲霉屬 香葉木素1-3-β-D葡聚糖檢測試劑盒
解脂假絲酵母 DL-薄荷14-3-3蛋白eta檢測試劑盒
白布勒擔孢酵母 N-(2',6'-二甲苯基)-2-甲酰15脂加氧酶檢測試劑盒
白靈側耳 高良姜素17β-雌二檢測試劑盒
靈芝屬 聚氧烯甘油GP17-羥皮質類固檢測試劑盒
黑木耳 單雙甘油脂肪酸脂17羥孕酮檢測試劑盒
美澳型核果褐腐病 7-異氧基異黃酮17-酮皮質類固檢測試劑盒
玉米大斑病 槐定堿1α羥化酶檢測試劑盒
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)