詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Caspase 1 Activity Assay Kit | 20次|100次 | 1~3天 |
商品介紹:
本試劑盒是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中caspase 1酶活性或純化的caspase 1酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時,除標準曲線外可以檢測20個樣品。 試劑盒組分: 裂解液——————8ml 檢測緩沖液——————8ml Ac-YVAD-pNA(2mM)———200μl pNA(10mM)——————200μl Caspase是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 1也稱interkeukin 1b conberting enzyme(ICE),有時被寫作caspase-1或caspase 1,是caspase家族中可以剪切IL-1b前體蛋白或IL-18前體產生相應成熟的細胞因子的caspase。Caspase 11可以剪切45kD的caspase 1前體蛋白,產生20kD和10kD的片段,這兩個片段可以形成異源二聚體(heterodimer),并進一步由兩個異源二聚體形成四聚體。Caspase 1可以通過剪切其凋亡Bcl-XL來調節細胞凋亡,并通過其對一些細胞因子前體的剪切來調控相關免疫反應。 本caspase 1活性檢測試劑盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA(acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide)產生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 1的活性。pNA在405nm附近有強吸收。 試劑盒中提供了caspase 1催化產生的黃色產物pNA,可以作為定量caspase 1酶活性的標準品。 儲存條件:-20℃。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
同型半胱(Hcy)英文名稱:Hcy ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體包裝1g
鐵調(Hepc)英文名稱:Hepc ELISA Kit雙調蛋白(結腸直腸源性生長因子)抗體包裝250mg
鐵蛋白(Ferritin)英文名稱:Ferritin ELISA Kit磷化通道蛋白2抗體包裝100g
鐵蛋白(FE)英文名稱:FE ELISA Kit粘附相關激抗體包裝25g
天門冬基轉移(AST)英文名稱:AST ELISA Kit磷化粘附相關激抗體包裝5g
天冬基轉移(AST)英文名稱:AST ELISA Kit磷化蛋白激B抗體包裝1g
糖原磷化同工MM(GP-MM)英文名稱:GP-MM ELISA Kit磷化通道蛋白2抗體包裝5g
糖原磷化同工II(GP-II)英文名稱:GP-II ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝1g
糖原磷化同工BB(GP-BB)英文名稱:GP-BB ELISA Kit磷化蛋白激B抗體包裝1g
糖原合成激(GSK)英文名稱:GSK ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝5g
糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)英文名稱:CDT ELISA Kit磷化活化轉錄因子4抗體包裝1g
糖皮質類固受體(GR)英文名稱:GR ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝5g
糖皮質激受體β(GR-β)英文名稱:GR-β ELISA Kit磷化雄激受體抗體包裝5mg
糖皮質激受體α(GR-α)英文名稱:GR-α ELISA Kit磷化蛋白激AKT1,2,3抗體包裝1g
糖類抗原199(CA199)英文名稱:CA199 ELISA Kit磷化蛋白激B抗體包裝1g
ANGEL1蛋白抗體胎蛋白(αFP)Ponatinib是一種有效的,可口服的多靶點激抑制劑,抑制Abl,PDGFRα,VEGFR2,FGFR1 和 Src 的 IC50 分別為0.37 nM,
Caspase 1 活性檢測試劑盒金龜子綠僵 四苯基氯化鏻α;β干擾素受體檢測試劑盒
牛型放線 2-氨基-4-氯代苯并噻唑α1抗胰蛋白酶檢測試劑盒
假桄榔葉點霉 3-氨基-3-(4-)酸α1酸性糖蛋白檢測試劑盒
厚壁芽孢桿 2-氟苯酸α1-微球蛋白檢測試劑盒
蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 4,4'-(2-甲基-6-乙基苯)α2-HS糖蛋白檢測試劑盒
哈茨木霉 磺二甲基嘧啶鈉鹽α2巨球蛋白檢測試劑盒
釀酒酵母 1-溴-2-乙基苯α2抗纖溶酶檢測試劑盒
豌豆根瘤 2,4-二氯αL巖藻糖苷酶檢測試劑盒
斑玉蕈 2-溴苯基乙α-N-乙酰-半乳糖氨酶檢測試劑盒
地霉半乳糖酵母 芐磺酰氯α-氨基羥甲基惡唑酸檢測試劑盒
粘著劍 1-溴-2,6-二氯苯α淀粉酶檢測試劑盒
Acinetobacter genospecies 2-氟-3-甲基-5-硝基吡啶α-防御素檢測試劑盒
膠孢 三(三溴新戊基)磷酸酯α-輔肌動蛋白4檢測試劑盒
紅球 D-(+)-二對甲氧基苯甲酰α甘露糖苷酶檢測試劑盒
松針散斑殼 2-氯-5-α干擾素檢測試劑盒