詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統,能大幅度提高產物特異性和反應靈敏度。同時,提供ROX作為內參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:戈氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Actinomyces gerencseriae
貨號:GOY-M3629
規格:50T
產品特性: 高特異性:本產品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產物的特 異性。 靈敏度:本產品包含的優化的緩沖液可檢測低拷貝數的模板,且重復性好。 高適用性:本產品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑以及穩定劑等。PCR 反應時,只需將適當的裂解混合液、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產品:
骨骼肌細胞25406-64-8氧還原蛋白過氧化物酶4檢測試劑盒
表皮角化細胞256925-92-5氧化型谷胱甘肽檢測試劑盒
真皮成纖維細胞2586-96-1氧化高密度脂蛋白檢測試劑盒
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破骨細胞26091-79-2氧化低密度脂蛋白檢測試劑盒
皮膚肥大細胞26116-89-2延伸蛋白A檢測試劑盒
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腦動脈血管平滑肌細胞26544-34-3牙本質基質蛋白1檢測試劑盒
腦靜脈血管內皮細胞26575-93-9循環免疫復合物檢測試劑盒
腦靜脈血管平滑肌細胞26575-95-1血影蛋白檢測試劑盒
腦膜細胞2673-40-7血血小板衍生生長因子可溶性受體α檢測試劑盒7.5%化鈉肉湯顆粒5(6)-CR110, SE [5-(and 6)-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Mixed isomers* 雞白介素1(IL-1)ELISA Kit
孟加拉紅培養基顆粒5-CR110, SE [5-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Single isomer* 雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit
Half-Fraser顆粒培養基6-CR110, SE [6-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Single isomer* 雞β內酰銨酶(β-lactamase)ELISA Kit
Fraser培養基顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA Kit
含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 雞α酮戊二酸脫酶(α-KGDHC)ELISA Kit
戈氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 雞α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA Kit
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬古霉素,(mLST-Vm)顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞α干擾素(IFN-α)ELISA Kit
TCBS瓊脂顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)ELISA Kit
改良EC肉湯(mEC+n)顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)ELISA Kit
EC肉湯顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞Toll樣受體4(TLR4)ELISA Kit
SS瓊脂顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit
堿性蛋白胨水顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 雞HSP90抗體(IgM)ELISA Kit
3%化鈉堿性蛋白胨水顆粒5(6)-TAMRA, SE [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine, succinimidyl ester] *Mixed isomers* 雞HSP90抗體(IgG)ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優點:分析簡單,實驗優化簡單
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態應用:基因表達調控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。