詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統,能大幅度提高產物特異性和反應靈敏度。同時,提供ROX作為內參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:枝頂孢霉探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Acremonium strictum
貨號:GOY-M3622
規格:50T
產品特性: 高特異性:本產品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產物的特 異性。 靈敏度:本產品包含的優化的緩沖液可檢測低拷貝數的模板,且重復性好。 高適用性:本產品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑以及穩定劑等。PCR 反應時,只需將適當的裂解混合液、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產品:
頜下腺上皮細胞18449-41-7音猬因子N端檢測試劑盒
腮腺細胞185051-75-6音猬因子檢測試劑盒
視網膜微血管內皮細胞18524-94-2抑制素β-B檢測試劑盒
小梁網細胞18609-17-1抑制素βA檢測試劑盒
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角膜內皮細胞18916-17-1異質性胞核核糖核蛋白L檢測試劑盒
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骨細胞19057-67-1異質性胞核核糖核蛋白K檢測試劑盒
滑膜細胞19083-00-2異質性胞核核糖核蛋白I檢測試劑盒10%化鈉胰酪胨大豆肉湯Recombinant Transformer 2 Beta (TRA2b)雞熱休克蛋白72(HSP-72)ELISA Kit
10%化鈉胰蛋白胨大豆肉湯Recombinant Transthyretin (TTR)雞熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit
李氏菌增菌肉湯(LB2)Recombinant Transferrin Receptor 2 (TFR2)雞熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA Kit
李氏菌增菌肉湯(LB1)Recombinant Centromere Protein B (CENPB)雞熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA Kit
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯Recombinant Centromere Protein F (CENPF)雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA Kit
堿性蛋白胨水管(10ml)Recombinant Membrane Protein, Palmitoylated 2 (MPP2)雞去腎上腺素(NA)ELISA Kit
營養肉湯管(含棉簽)Recombinant Membrane Protein, Palmitoylated 6 (MPP6)雞前列腺素F2α(PGF2α)ELISA Kit
李氏菌增菌肉湯(LB2)管Recombinant Podocin (PDCN)雞前列腺素E2(PGE2)ELISA Kit
枝頂孢霉探針法熒光定量PCR試劑盒0.9%無菌化鈉溶液管Recombinant Podocalyxin (PCX)雞皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit
硫醇酸鹽流體培養基管Recombinant Prohibitin (PHB)雞免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit
沙氏葡萄糖液體培養基管Recombinant Cathepsin D (CTSD)雞免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit
沙門氏志賀氏增菌液管Recombinant Cathepsin L (CTSL)雞免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit
胰酪大豆胨液體培養基管Recombinant Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1)雞免疫核糖核酸(Irna)ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優點:分析簡單,實驗優化簡單
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態應用:基因表達調控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。