詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統,能大幅度提高產物特異性和反應靈敏度。同時,提供ROX作為內參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:變形絲囊霉菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Aphanomyces astaci
貨號:GOY-M3666
規格:50T
產品特性: 高特異性:本產品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產物的特 異性。 靈敏度:本產品包含的優化的緩沖液可檢測低拷貝數的模板,且重復性好。 高適用性:本產品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑以及穩定劑等。PCR 反應時,只需將適當的裂解混合液、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產品:
轉錄因子E2F-2抗體78281-02-4熱穩定抗原檢測試劑盒
人乳頭瘤病16型E7抗體78478-28-1缺血修飾白蛋白檢測試劑盒
膠質細胞谷氨酸運載蛋白1 抗體78763-58-3犬尿氨酸檢測試劑盒
EB病編碼核蛋白-3抗體79498-31-0醛脫酶7家族,成員A1檢測試劑盒
內皮素轉化酶1ECE1抗體79592-91-9醛糖還原酶檢測試劑盒
食道癌相關基因抗體79916-77-1醛縮酶檢測試劑盒
細胞外基質蛋白1抗體80154-34-3醛固酮檢測試劑盒
外胚層發育不良抗體80286-58-4去酰化酶Sirtuin-7檢測試劑盒
表皮生長因子受體抗體80321-69-3去酰化酶Sirtuin-6檢測試劑盒
表皮生長因子受體-8抗體80418-24-2去酰化酶Sirtuin-5檢測試劑盒
早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗體80418-25-3去酰化酶Sirtuin-4檢測試劑盒
表皮膜蛋白1抗體80651-76-9去酰化酶Sirtuin-2檢測試劑盒
抗子宮內膜抗體80665-72-1去酰化酶Sirtuin-1檢測試劑盒腸道菌增菌肉湯(EE)Coelenterazine n 大鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA Kit
西蒙氏枸櫞酸鹽培養基Coelenterazine 大鼠花生四烯酸12-脂氧合酶,白細胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)ELISA Kit
阪崎腸桿菌成套生化鑒定管Coelenterazine cp 大鼠花生四烯酸(AA)ELISA Kit
腸球菌肉湯Coelenterazine f 大鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA Kit
變形絲囊霉菌探針法熒光定量PCR試劑盒腦心浸液肉湯Coelenterazine h 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α )ELISA Kit
多粘菌素BCoelenterazine hcp 大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA Kit
腦-心浸萃液態培養基Coelenterazine n 大鼠和肽素(copeptin)ELISA Kit
腦心浸液瓊脂(BHIA)Ratio Works™ pH sensor I *Cell-permeable* 大鼠含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)ELISA Kit
Pfizer腸球菌選擇性瓊脂(PSE瓊脂)Ratio Works™ pH sensor II *Cell-permeable* 大鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)ELISA Kit
MEI培養基Ratio Works™ pH sensor III *Cell-permeable*大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)ELISA Kit
北沙參亞碲酸鈉胨水培養基基礎MEQ [6-Methoxy-N-ethylquinolinium iodide]大鼠過氧化酶(CAT)ELISA Kit
豆粉瓊脂SPQ [6-Methoxy-N-(3-sulfopropyl)quinolinium]大鼠果糖銨(FRA)ELISA Kit
磷酸鹽緩沖液(pH7.2)TSQ [N-(6-Methoxy-8-quinolyl)-p-toluenesulfonamide]大鼠胱抑素SN(CST1)ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優點:分析簡單,實驗優化簡單
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態應用:基因表達調控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。