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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
20T | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
保存條件：-20℃冰凍保存一年。 工作原理： 在機體內部隨時都在發生著細胞的死亡。傳統上用顯微鏡來觀察細胞的死亡，其特征為核染色質的濃縮及碎片的形成。但是這種現象出現的很晚，時間也很短暫。凋亡的特征是內源性核酸內切酶被激活，細胞自身的染色質或DNA 被切割，出現單鏈或雙鏈缺口，并產生與 DNA 斷點數目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 結合在 DNA 斷點部位，可以通過生物標記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后，再結合鏈酶親和素-熒光素 FITC(SABC-FITC)。FITC 在 490-495nm 激化，在 520-530nm 發射熒光，呈黃綠色。凋亡的細包核呈黃綠色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。 試劑盒內容： 1．標記緩沖液(Labeling Buffer)1ml 2．末端脫氧核糖核酸轉移酶(TdT,×20)20μl 3．DIG-dUTP(×20)20μl 4．封閉液(Blocking Reagent)4ml 5．生物素化抗抗體(× 100)20μl 6．SABC-FITC(× 100)20μl 7．Proteinase K(×200)50μl 8．抗體稀釋液 4ml |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)英文名稱：FGFR1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白157抗體包裝5g
成纖維細胞生長因子7(FGF7)英文名稱：FGF7 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白90B抗體包裝10MG
成纖維細胞生長因子3(FGF3)英文名稱：FGF3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白144A抗體包裝25g
成纖維細胞生長因子23(FGF23)英文名稱：FGF23 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白104抗體包裝5g
成纖維細胞生長因子18(FGF18)英文名稱：FGF18 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白12抗體包裝1g
成纖維細胞生長因子15(FGF15)英文名稱：FGF15 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白67抗體包裝25g
成纖維細胞生長因子13(FGF13)英文名稱：FGF13 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白129抗體包裝5g
成纖維細胞生長因子12(FGF12)英文名稱：FGF12 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白107抗體包裝1g
成纖維細胞生長因子11(FGF11)英文名稱：FGF11 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白18抗體包裝5g
成纖維細胞激活蛋白α(FAPα)英文名稱：FAPα ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白56抗體包裝1g
沉默調節蛋白6(SIRT6)英文名稱：SIRT6 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白116抗體包裝5g
沉默調節蛋白1(SIRT1)英文名稱：SIRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白117抗體包裝1g
超氧化物歧化1(SOD1)英文名稱：SOD1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白127抗體包裝100g
腸型脂肪結合蛋白(FABP2)英文名稱：FABP2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白138抗體包裝25g
叉頭框蛋白P3(FOXP3)英文名稱：FOXP3 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白144NL抗體包裝5g
立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質量規格：>99%,BR游離狀腺試劑盒2-O-乙酰山椒子烯;
龐蒂亞克亞硫鹽桿菌Sulfitobacter│pontiacus 質量規格：HPLC>98%,標準品游離睪試劑盒柚皮-7-O-葡萄糖苷;Narin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規格：>98%,BR游離蛋白S試劑盒異飛薊賓;Isosilybin
細胞凋亡檢測試劑盒III(FITC)白色姜成林氏 2,3-二氯CD19分子Elisa
矮棒曲霉 N'-叔丁氧羰基-L-鳥氨酸結核Elisa
大腸埃希氏桿 曲洛斯坦GTP環化水解1Elisa
條紋雞樅 異酸酯烯酸乙酯肝鈉Elisa
擬青霉 非那吡啶鹽酸鹽五聚Elisa
泛屬 2,3-二氟苯丁卵磷脂膽固酰基轉移Elisa
擲抱酵母 硫代酰乙酯霍亂Elisa
黑木耳(植5) 6-甲基-2-吡啶甲酸甲酯線粒體解偶聯蛋白2Elisa
釀酒酵母 溴化六氨合鈷 (metals basis)抗連接IgG抗體Elisa
釀酒酵母 3-基-4-三氟甲基吡啶抗Abeta IgG抗體Elisa
白色短波單胞 3-基-2,6-二氯-4-(三氟甲基)吡啶微管相關蛋白1A；1B輕鏈3BElisa
挪威畢赤酵母 β-托品組蛋白脫乙酰基6Elisa
華根霉 3-氨基-2-溴-6-甲氧基吡啶腺苷Elisa
黃曲霉 鄰溴苯酸乙酯FAM19A4Elisa
香菇 吡唑解草酯抗風疹病IgG抗體Elisa
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