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詳細介紹
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
250ml×3 | 1～3天 |
商品介紹：
瑞氏染液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。 操作步驟 1. (選做)平置血涂片于染色架上，滴加甲醇固定液，室溫固定15-30 分鐘。 2. 吸去固定液，室溫通風晾干。 3. 將試劑一滴加到載玻片上，均勻覆蓋住載片上血細胞，染色時間約為1 分鐘。等染液有變紅的趨勢時，迅速滴加兩倍試劑一的量的試劑二。繼續(xù)染色5 到8 分鐘。 4. 小股水流洗片，防止將大量的細胞從載片上沖落下來從而影響以后的觀察。30s 水洗結(jié)束后將載片放到陰涼處風干。 5. 顯微鏡鏡檢。 染色結(jié)果 1. 紅細胞呈淺紅色，中央稍淡而略有蝶形態(tài)。 2. 白細胞系統(tǒng)清晰易分，細胞膜清晰呈紫黑色，細胞核著色呈深淺不同的紫紅色，胞漿中各種顆粒區(qū)分明顯。其中中性粒細胞漿中顆粒呈淡紫紅色，嗜酸粒細胞漿中顆粒呈桔紅色、嗜堿性粒細胞胞漿中顆粒呈藍褐色。單核細胞的胞漿呈灰藍色，胞漿中顆粒呈細小淡紫紅色或藍紫色。淋巴細胞胞漿呈淡藍色。 注意事項 1. 推片：取全血3 微升左右置載玻片上，將推玻片保持與載玻片30 度角，置于血滴正前方，稍往后移與血滴接觸，即可見血液沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面向前滑動，至血液鋪完血膜為止。 2. 涂片時不要太厚也不要太薄，太厚紅細胞重疊并易皺，太薄時不易找到白細胞。 3. 用蠟筆在血膜兩頭劃線，平放于染色架上。血膜要干透后才能染色，否則染色時血膜易脫落。 4. 試劑一及二染液不能過少，以防很快蒸發(fā)引起染液沉淀。試劑一不可少于400 微升，試劑二是試劑一的1 倍量。滴加試劑一及二時要輕搖玻片或用洗耳球?qū)恃禋猓谷疽撼浞只旌稀?/span> 5. 鏡檢時如果紅細胞偏藍，請放在蒸餾水中1-3 分鐘，直至紅潤為止。 6. 染色過淡，可復(fù)染。染色過深，可用水沖洗或浸泡，還可用75%乙醇脫色3-5 秒。 儲存：2～8℃，避光，有效期12個月。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
伊維菌(標準品)英文名稱： Aucubin微管相關(guān)蛋白EB家族3抗體包裝25g
依達拉奉（標準品）英文名稱： Metronidazole真核翻譯起始因子5抗體包裝5g
依法韋侖(標準品)英文名稱： Metronidazole遺傳性前列腺癌蛋白2抗體包裝25g
依那普利拉（標準品）英文名稱： 8-O-Acetylharpagide磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g
依那普利雙（標準品）英文名稱： Chrysoobtusin磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝25ml
依諾肝鈉(標準品)英文名稱： Myristicin磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5ml
依諾沙星(標準品）英文名稱： Kakuol染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區(qū)域穩(wěn)定必需蛋白抗體包裝100mg
依帕司他(標準品)英文名稱： L-Asarinin上皮微管相關(guān)蛋白7抗體包裝1g
依普利（標準品）英文名稱： Gitogenin堿性鞘磷脂7抗體包裝100g
依替膦二鈉（標準品）英文名稱： Isoliquiritigenin表皮生長因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝25g
依替米星（標準品）英文名稱： Isoliquiritigenin長鏈脂肪延長長ELOVL6抗體包裝100g
*度(標準品)英文名稱： Ginsenoside Re酪蛋白激受體A6抗體包裝25g
*度（標準品）英文名稱： Ginsenoside F4酪蛋白激受體A3抗體包裝5g
*紅霉(標準品)英文名稱： Ginsenoside RK3酪蛋白激受體A7抗體包裝1g
*(標準品)英文名稱： Ginsenoside RH4酪蛋白激受體B1抗體包裝5g
腐皮鐮孢Fusarium│solani 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白試劑盒2,3,5,4’-四羥基二乙烯-2-O
: ATCC27562=DSM10143=NBRC15645=JCM3725=BCRC12905=CCRC12905=CECT529=CCUG13448資源名稱: 創(chuàng)傷弧菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標準品糖皮質(zhì)激受體β試劑盒石吊蘭;Lysionotin
短芽孢桿菌Bacillus│pumilus 質(zhì)量規(guī)格：>900μg//mg,USP,BR糖皮質(zhì)激受體α試劑盒射干苷元;tectorigenin
快速瑞氏染液泡盛曲霉 反-2-己烯酸乙酯3氧-5β-類固脫氫Elisa
惡臭假單胞 2-羥基-3-吡羧酸甲酯3α羥基類固3-脫氫Elisa
條紋白蟻傘 3,6-二氯噠-4-3α羥基類固脫氫Elisa
傘枝犁頭霉 4-溴-1H-吡咯-2-羧酸20α羥基類固脫氫Elisa
米曲霉 [3-(二甲基氨基)基]三苯基磷溴化物氫鹽類固21單加氧Elisa
炭黑曲霉 3-氨基-2-甲氧基吡啶-5-酸頻哪酯耳椎蛋白90Elisa
Actinomadura cellulosilytica 2-(2-吡啶基)異硫脲-N-氧化物鹽酸鹽trip13Elisa
大腸埃希氏 烯異噻唑P450膽固側(cè)鏈裂解Elisa
河生腸桿 5(6)-氨基熒光內(nèi)啡肽Elisa
網(wǎng)孢正青霉 氯羰基亞磺酰氯CORINElisa
白假絲酵母 1,2,4,5-環(huán)己烷四甲酸二酐髓樣分化因子88Elisa
冷溫木拉克酵母 5-乙基-4-羥基-2-甲基-3(2H)-呋喃酮甘油-3-磷酸脫氫抗體Elisa
卡莫納枝芽孢桿 L-環(huán)己基氨酸新型隱球抗體Elisa
黑曲霉 咪唑并[1,2-a]嘧啶基質(zhì)金屬蛋白1Elisa
地霉 反-4-氨基環(huán)己抗反應(yīng)蛋白7A域抗體Elisa
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