詳細介紹
商品介紹:
內質網染色試劑盒是利用E系列探針進行內質網特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的E01內質網染色探針為藍色熒光標記的內質網探針,具有373/430nm的大激發/發射波長。 E系列探針是一種細胞滲透型的對活細胞中的內質網體進行選擇性染色的一類新型熒光染料,該系列探針可以選擇性標記內質網。只需簡單孵育細胞,即可穿過細胞膜并直接聚集在活性內質網上。可有效標記活細胞。一旦內質網被染色后,還能根據后續實驗的需求進行固定(醛類固定劑如)和透化(醛類去污劑如Triton X-100),探針依然維持在細胞內。 E系列內質網探針具有多種顏色可以選擇,可根據情況對樣品進行多色標記實驗。除了本試劑盒的紅色熒光探針,我公司還可以提供綠色、紅色等顏色的染色試劑盒。 儲存條件:染料-20℃避光保存;避免反復凍融;稀釋液2-8℃保存。 有效期:6個月 |
產品屬性:
中文名稱:內質網染色試劑盒(藍色熒光)
英文名稱:
產品規格:125T|250T
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
金松雙黃(標準品)英文名稱: Benzyl acetateG蛋白偶聯受體18抗體包裝5g
金鐵鎖(標準品)英文名稱: Bensulfuron-methylG蛋白偶聯受體65抗體包裝100ml
金銀花(標準品)英文名稱: Benazolin-ethyl ester生長終止特異性同源盒基因抗體包裝500ml
金櫻根(標準品)英文名稱: 3,4-Benzopyrene谷受體2抗體包裝100g
金櫻子(標準品)英文名稱: (±)-1,3-Butanediol谷受體3抗體包裝25g
金盞銀盤(標準品)英文名稱: Butachlor solution谷受體4抗體包裝500g
筋骨草甾C英文名稱: Butachlor促代謝型谷受體1抗體包裝1g
錦燈籠(標準品)英文名稱: Butachlor solution甘受體α4抗體包裝250mg
京大戟(標準品)英文名稱: Butachlor solution生長分化因子8抗體包裝50mg
京尼平(標準品)英文名稱: Buturon磷化糖原合激-3β抗體包裝1g
京尼平甙(標準品)英文名稱: Bromopropylate solutionGlu-Glu tag抗體包裝25g
京尼平苷(標準品)英文名稱: Bromopropylate solution胰高血糖樣肽-2抗體包裝5g
荊芥(標準品)英文名稱: Bronopol甘受體alpha 1/2/3型抗體包裝250mg
荊芥穗(標準品)英文名稱: Benfluralin抑制型G蛋白α3抗體包裝25g
九里香(標準品)英文名稱: Benzo(k)fluoranthene促性腺激釋放激受體抗體包裝5g
腐皮鐮孢Fusarium│solani 質量規格:>98%,培養級趨化因子配體17試劑盒牛磺鵝去氧膽 ;Taurochenod
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>98%,BR趨化因子26試劑盒牛血清白蛋白;Bovine albumi
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規格:HPLC>98%,標準品趨化因子2試劑盒耐斯糖;Nystose
內質網染色試劑盒(藍色熒光)膠胞 3-喹啉成纖維生長因子4Elisa
美濃鏈霉 4,4′-雙[(4-溴苯基)苯氨基]聯苯突觸標記蛋白7Elisa
細黃鏈霉 2-甲氧基-5-磺酰甲酯熱穩定抗原Elisa
水生鞘氨單胞 Tris(dimethylphenylphosphine)](2,5-norbornadiene)r二十二碳六烯酸Elisa
球孢白僵 1,1-聯苯-4-基-1-丁鹽酸鹽抗類固生成抗體Elisa
鏈霉 2,3-二氯苯乙全轉運谷氨酸Elisa
米曲霉 2,5-二基溴化鎂 (1M THF溶液)C-C趨化因子受體6Elisa
水生屈曲桿 N6-苯甲酰基-脫氧腺苷白酯Elisa
大孢子鏈霉 十乙二單甲15s-羥化二十碳四烯酸Elisa
Winogradskyella damuponensis 1H-吡咯并(2,3-d)嘧啶幾丁質1Elisa
茶云紋葉枯病 4-苯甲酰基苯酸纖維蛋白原βElisa
輪枝(大豆胞囊線蟲卵寄生真) 氯烯鎂β抑制蛋白1Elisa
粘蓋牛肝* 直接紅80維甲酸誘導基因1蛋白Elisa
巴斯德畢赤酵母 9-苯基-9-芴病誘導信號適配蛋白Elisa
釀酒酵母 Thionin perchlorateB-κ-輕肽基因增強子抑制因子激βElisa