詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:抗酒石酸酸性磷酸酶染液
英文名稱:
產品規格:20T
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
檢驗原理: 在酸性的緩沖液中,細胞內酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物進而與一種穩定的重氮鹽偶聯,生成不溶性的偶氮染料沉淀,當底物中存在酒石酸時,該反應只出現在特異性細胞中。 用途: 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色可以了解破骨細胞的功能狀態,并對毛細胞性白血病有助診斷,本染液可用于石蠟切片、血液、骨髓及培養細胞的涂片、爬片、以及冰凍切片的細胞染色。 儲存:4℃,有效期6個月。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鹽伊托必利(標準品)英文名稱: Oleanolic acid電子轉移黃蛋白脫氫抗體包裝25g
鹽依匹斯汀(標準品)英文名稱: Oleanolic acidEGF受體7跨膜結構域蛋白1抗體包裝5g
鹽乙丁(標準品)英文名稱: Oleanolic acid乙激2抗體包裝25g
鹽乙哌立松(標準品)英文名稱: Shikimic acid磷化Ets轉錄因子家族ets1抗體包裝5g
鹽異(標準品)英文名稱: Shikimic acid磷化上皮癌轉化蛋白2抗體包裝100g
鹽異腎上腺(標準品)英文名稱: Riociguat嗜性粒過氧化物抗體包裝10g
鹽左西替利(標準品)英文名稱: Pheniramine Maleate核內切G抗體包裝25g
鹽左旋咪唑(標準品)英文名稱: FTase Substrate, Fluorogenic酪蛋白激受體A10抗體包裝500g
鹽左氧沙星(標準品)英文名稱: Linaclotide 胞吐囊復合體蛋白2抗體包裝100ml
氧沙星(標準品)英文名稱: benzoylpaeoniflorin 磷化4E結合蛋白1抗體包裝25ml
氧(標準品)英文名稱: 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝1g
葉(標準品)英文名稱: Alisol A 24-acetate泛交聯抗體包裝250mg
伊潘立(標準品)英文名稱: Alisol C monoacetate EB病核抗原-3B抗體包裝100g
伊曲康唑(標準品)英文名稱: Sclareolide磷化驅動蛋白樣蛋白1抗體包裝25g
伊索拉定(標準品)英文名稱: Sclareolide乙酰基轉移EID1抗體包裝5g
: IFFI06005資源名稱: 嗜乳桿菌 質量規格:potency>980ug/mg,BR糖原合成激3試劑盒桑皮苷A;mulberroside A
土地戈登氏菌Gordonia│terrae 質量規格:HPLC>98%,標準品糖原合成激試劑盒麝香;3-Methylcyclopen
果生鏈核盤菌Monilinia│fructigena Honey 質量規格:94.0-105.0%,USP,BR糖原合成天然;Borneol
抗酒石酸酸性磷酸酶染液球形芽孢桿 葉綠銅鈉鹽戊型肝炎病抗原Elisa
地中海擬無枝酸 沙美特羅類白抗原B27Elisa
熱帶假絲酵母 苯基-β-D-吡喃半乳糖苷補體因子PElisa
出芽短梗霉 5-氨基異酞酸單甲酯絲氨酸肽抑制因子Kazal型4Elisa
空腸彎曲桿 芐基苯基碳酸酯色P4503A4Elisa
佛雷德里克斯堡假單胞 2-氨基-6-溴乙型腦炎病IgG抗體Elisa
Aurantimonas coralicida 2,6,7-三氯-3-三氟甲基喹喔啉維甲酸誘導基因1蛋白Elisa
疏水戈登氏 N-異基-4甲酸類固硫酸酯Elisa
熒光假單胞 9-雙環[3.3.1]壬烷磺基轉移Elisa
濟州單胞 鄰芐基苯3β羥基5類固脫氫Elisa
黑根霉 9-溴-1-壬烯膽固7α羥化Elisa
谷氨酸棒桿 2-溴-6-羥基吡啶類固17α單加氧Elisa
蠟狀芽孢桿 4-(2,2,2-三氟乙氧基)類固異構Elisa
油菜核病 4-氨基-2-氯-3-硝基吡啶皮質類固11β脫氫同工1Elisa
施氏假單胞 L-乳酸鋰皮質類固11β脫氫同工2Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)