詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統,能大幅度提高產物特異性和反應靈敏度。同時,提供ROX作為內參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應目的模板DNA的濃度。產品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma agalactiae
貨號:GOY-M4253
規格:50T
產品特性: 高特異性:本產品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產物的特 異性。 靈敏度:本產品包含的優化的緩沖液可檢測低拷貝數的模板,且重復性好。 高適用性:本產品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑以及穩定劑等。PCR 反應時,只需將適當的裂解混合液、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產品:
川貝母(標準品)75-78-5唾液酸轉移酶7E(SIAT7E)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川陳皮素(標準品)544-97-8突觸囊泡蛋白Ⅸ(SYT9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川燈心草(標準品)6131-99-3Nesprin 3蛋白(Nesp3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川楝素(標準品)67-68-5滑行蛋白γ(TXLNγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川楝子(標準品)109-87-5POLQ樣蛋白解旋酶(HELQ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川麥冬苷A540-63-6原鈣黏素24(PCDH24)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川木通(標準品)1317-33-5Talanin蛋白(TALN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川木香(標準品)75-15-0Twist鄰位子(TWISTNB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川牛膝(標準品)770-12-7APEX核酸酶2(APEX2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川射干(標準品)79-36-7二二醇脫酶(DHDH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川烏(標準品)2893-78-9唾液酸轉移酶8E(SIAT8E)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒川西獐牙菜(標準品)1271-42-7Ropporin 1蛋白(ROPN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
川芎(標準品)661-19-8Gremlin 2蛋白(GREM2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1 異硫氰酸胍
Chloral hydrateGuinea pig Arg (Arginase) ELISA Kit
大鼠白介素17 鹽酸胍
Ruthenium(III) chlorideGuinea pig FABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit
人抗糖蛋白抗體 2,6-二叔基對酚
Ninhydrin hydrateGuinea pig ApoB100 (Apolipoprotein B100) ELISA Kit
大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ 2-亞硝基-1-萘酚
IRON PEPTONATEGuinea pig bTC (Betacellulin) ELISA Kit
小鼠骨成型蛋白7 4-氧基酚
CENTA(TM) BETA-LACTAMASE SUBSTRATEGuinea pig FABP3 (Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle and Heart) ELISA Kit
人抗單核細胞抗體 香酚
Salicylhydroxamic acidGuinea pig AMA IgA (Anti-Myelin antibody IgA) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優點:分析簡單,實驗優化簡單產品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態應用:基因表達調控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。