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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
100T | 1～3天 |
商品介紹：
Hoechst33342/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒是采用DNA探針雙染細胞核的方法檢測細胞的狀態。Hoechst33342染色液A可以透過正常細胞膜，而細胞凋亡后，細胞膜對Hoechst33342染色液A的通透性增加，PI染色液B不能透過細胞膜，對正常細胞和凋亡細胞不能染色，而對壞死細胞可以染色。用兩種染色液對細胞進行雙染后，使用流式細胞儀或熒光顯微鏡即可對細胞狀態進行檢測。在雙變量流式細胞儀的散點圖上，這三群細胞表現分別為：正常細胞為低藍色/低紅色(A+/B+)，凋亡細胞為高藍色/低紅色(A++/B+)，壞死細胞為低藍色/高紅色(A+/B++)。 儲存條件：A液和B液-20℃避光保存。C液2-8℃保存。 有效期：一年。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
蘋果舒尼替尼英文名稱： Clarithromycin 濃縮2復合亞基D3抗體包裝500g
羥基脲英文名稱： Clarithromycin 磷化分裂周期蛋白6抗體包裝1g
曲美替尼英文名稱： Clindamycin Phosphate磷化周期依賴激2抗體包裝5g
塞卡替尼英文名稱： Clindamycin Phosphate碳酐12抗體包裝1g
三亞乙基硫代磷酰英文名稱： Clofarabine泛載體蛋白R2抗體包裝250mg
色瑞替尼,LDK378英文名稱： Clotrimazole粘附分子3抗體包裝5g
舒尼替尼堿英文名稱： Clotrimazole整合相關蛋白CD47包裝1g
順鉑英文名稱： Colchlcine磷化角蛋白8抗體包裝5g
司莫司汀英文名稱： Colchlcine鈣結合蛋白D28K抗體包裝100g
他克莫司英文名稱： Colistin Sulphate磷化接頭蛋白CrkL抗體包裝100g
他米巴羅汀英文名稱： Colistin Sulphate磷化接頭蛋白CrkL抗體包裝25g
坦度替尼;MLN518英文名稱： Eflornithine HCl促腎上腺皮質釋放激受體1抗體包裝500g
坦西莫司， 西羅莫司脂化物英文名稱： Cromolyn sodium磷化絲切蛋白抗體包裝1g
替拉替尼英文名稱： Cromolyn sodium皮層肌動蛋白抗體包裝5g
替莫唑英文名稱： Cyclosporine A促腎上腺皮質釋放激受體2抗體包裝25g
ATCC-VR31資源名稱: 人埃柯病毒 質量規格：HPLC含量測定胰島樣生長因子2 mRNA結合蛋白2試劑盒異香蘭;Isovanillin
AS2.541資源名稱: 釀酒酵母 質量規格：>97.0%,BR胰島樣生長因子1受體試劑盒原阿片堿;Protopine
異常漢遜酵母異常變種Hansenula│anomala var. anomala 質量規格：>98.5%,BR胰島樣生長因子1試劑盒異龍腦;DL-Isoborneol
Hoechst33342/PI雙染試劑盒黃曲霉 D730大孔徑強堿性陰離子樹脂脂肪分化相關蛋白Elisa
冬菇 美洛培南三水合物鈣;鈣調蛋白依賴性蛋白激1DElisa
屎腸球 銅鐵試劑一氧化氮Elisa
短小芽孢桿 更名不慌供應 鉻片熱休克70kDa蛋白12AElisa
絨邊膠盤孢 硫酸鈦熱休克蛋白Elisa
大豆擬莖點種腐病 XDA-1B大孔樹脂磷酸甘油酸變位5Elisa
杏鮑菇 水溶性霍霍巴油淀粉樣蛋白Elisa
肺形側耳 吡咯喹啉醌組氨酸Elisa
大腸埃希氏 7,8-二羥基黃酮單純皰疹病1抗體Elisa
枯草芽孢桿 硬脂酰乳酸鈉巨噬集落激因子Elisa
枯草芽孢桿 甜橙油轉化生長因子Elisa
小紅酵母 20-120kDa預先染色分子量MARK絲裂原活化蛋白激1Elisa
枯草芽孢桿 胎牛血清500ml/XQ-B0500二酸單酰Elisa
球形節桿 胎牛血清100ml/XQ-B0100間接膽紅Elisa
米曲霉 胎牛血清50ml/XQ-B0050朊病蛋白Elisa
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