詳細介紹
商品介紹:
目前常用的細胞增殖標記物有4種,DNA聚合酶α(DNA polymerase α),增殖細胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA),Ki-67和5-溴脫氧尿嘧啶核苷(Brdu)。其中Brdu為組織細胞非內源性表達存在,應用相對較廣。Brdu,也稱為溴化去氧尿苷,一種合成的胸苷類似物,在S期可替代胸腺嘧啶核苷選擇性結合到細胞DNA中。從而檢測細胞DNA合成和標記細胞分裂,凋亡等行為。在遺傳研究中Brdu可通過活體注射或細胞培養加載,然后使用抗Brdu的單克隆抗體進行特異性標記,ICC或IHC法染色法顯示增殖細胞。另外,還能同時結合其它細胞標記物,雙重染色,來判斷增殖細胞的種類,增殖速度等,對研究細胞動力學有著重要意義。 CAS:59-14-3 分子式:C9H11BrN2O5 分子量:307.10 外觀:白色或類白色粉末 熔點:187~189℃ 純度(Purity, HPLC):≥99% 溶解性:溶于1M 氫氧化銨(50 mg/ml),水(高達10 mg/ml);溶于DMF,DMSO,水(加熱)(50-100 mg/ml) 儲存條件:-20℃,有效期2年 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) | 100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
毒蕈堿型膽堿受體M3(CHRM3)英文名稱:CHRM3 ELISA Kit毛細管形態發生蛋白1抗體包裝100g
毒蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)英文名稱:CHRM2 ELISA Kit肌鈣集蛋白/收鈣抗體包裝25g
凋亡蛋白激活因子1(APAF1)英文名稱:APAF1 ELISA Kit鈣結合蛋白樣39抗體包裝5g
淀粉樣前體蛋白(APP)英文名稱:APP ELISA Kit癌胚抗原相關粘附分子3抗體包裝1ml
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1)英文名稱:APLP1 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框31抗體包裝1g
淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)英文名稱:Aβ1-42 ELISA Kit成簇相關蛋白1抗體包裝25g
淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)英文名稱:Aβ1-40 ELISA Kit腫瘤/抗原2抗體包裝5g
碘腺原脫碘Ⅲ(DIO3)英文名稱:DIO3 ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝1g
碘腺原脫碘Ⅱ(DIO2)英文名稱:DIO2 ELISA Kit皮膚T淋巴瘤相關抗原5抗體(腦膜瘤表達抗原6)包裝5g
抵抗(RETN)英文名稱:RETN ELISA Kit腫瘤/抗原3抗體包裝10mg
低氧誘導因子2α(HIF2α)英文名稱:HIF2α ELISA Kit腦多巴神經營養因子抗體包裝1g
低氧誘導因子1α(HIF1α)英文名稱:HIF1α ELISA Kit鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關蛋白抗體包裝5g
低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP1)英文名稱:LRP1 ELISA Kit膽囊收縮A受體抗體包裝100mg
低密度脂蛋白受體銜接蛋白1(LDLRAP1)英文名稱:LDLRAP1 ELISA Kit小腦肽3抗體包裝1g
低密度脂蛋白受體(LDLR)英文名稱:LDLR ELISA Kit周期依賴性激樣5抗體包裝1g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格:>98%,BR,醋鹽形式遠端上游元件結合蛋白1試劑盒鹽伊立替康;Irinotecan hy
: ivcas7.00510資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質量規格:>920U/MG,USP原纖維蛋白-1試劑盒氧化前胡;Oxypeucedanin
Z20259資源名稱: 嗜熱鏈球菌 質量規格:>97%原鈣黏1試劑盒羊藿次苷I;Icarisid I
5-溴脫氧尿嘧啶核苷Paraconiothyrium sp. 4-乙酸乙酯植酸Elisa
火木層孔 六鈷酸鋅植酸Elisa
異常漢遜酵母 鹽酸奧洛他定癸酸甘油酯-1Elisa
鍺栓孔 (淡黃褐栓) 1-(N-Boc-氨乙基)哌40S核糖體蛋白S3Elisa
德氏乳桿保加利亞亞種 4-脲脊髓灰質炎病IgG抗體Elisa
脫硫弧脫硫亞種(脫硫微螺、脫硫螺、脫硫桿、脫硫芽孢弧、脫硫弧) 乙二四乙酸銅鈉二水合物脊髓灰質炎病IgM抗體Elisa
松針散斑殼 苯基胍碳酸鹽可溶性CD28分子Elisa
生假絲酵母 5-甲基-2-呋喃基質金屬蛋白14Elisa
腫痂鏈霉 2,2-二甲基-3-羥基酸甲酯狀瘤病16抗體Elisa
光柄滑銹傘 2-甲氧基-4-甲基嘧啶狀瘤病18抗體Elisa
遼寧類芽孢桿 4-巴豆酸抗Sa抗體Elisa
蟻巢傘屬 羥酸銨鹽球蛋白G Fc段受體ⅠElisa
大腸埃希 球蛋白G Fc段受體ⅡElisa
運動節桿 三乙酰酮鋁性休克綜合征1Elisa
釀酒酵母 3,5-二溴吡啶-4-甲酸色P4502D6Elisa