線粒體細(xì)胞核轉(zhuǎn)位分析試劑盒(HCS法)公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-NF-KappaB p105 (Ser927) 化核因子p50/k因結(jié)合核因子抗體異辛 99%
Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933) 化核因子p50/k因結(jié)合核因子抗體庚 98%
NGFR/p75NTR 神經(jīng)生長因子受體抗體異丁 99%
NGF-beta 神經(jīng)生長因子-β抗體辛 99%
NG

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

鹽塞利洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Triethylenethiophosphoramide核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ENT2抗體包裝100g

鹽噻匹定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pramipexole Base鳥嘌呤核苷交換因子4包裝25g

鹽賽庚啶（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pramipexole Base磷化紅膜條帶4.1蛋白抗體包裝5g

鹽賽洛唑啉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Genistein磷化酪蛋白激受體B1抗體包裝25g

鹽三拉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Genistein蛋白激受體B1+B2抗體包裝5g

鹽沙沙星;鹽沙拉沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Luteolin磷化神經(jīng)鳥苷置換因子Ephexin1抗體包裝10ml

鹽舍曲林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Luteolin磷化Ephrin B抗體包裝50ml

鹽雙環(huán)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ursolic acid惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體包裝100mg

鹽司他斯汀（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ursolic acid磷化紅生成受體抗體包裝500mg

鹽四環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Diosmetin磷化HER2受體抗體包裝100mg

鹽索他洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diosmetin磷化HER2受體抗體包裝100g

鹽坦洛新（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytisine磷化HER2受體抗體包裝25g

鹽特比萘芬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytisine磷化HER3受體抗體包裝100g

鹽特拉唑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Irbesartan磷化HER4抗體包裝25g

鹽替吡嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic acid磷化HER4抗體包裝5g

枝芽胞桿菌Virgibacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,五合物糖脂抗體試劑盒三聚;Melamine

香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品糖盞蛋白鼠李糖;L-Rhamnose monoh

大球蓋菇Stropharia│rugosoannulata Farl. ex Murrill 質(zhì)量規(guī)格：>590IU/MG,BR糖原磷化同工MM試劑盒晶蘭苷;monotropein
線粒體細(xì)胞核轉(zhuǎn)位分析試劑盒(HCS法)斑玉蕈 2-氨基-5-溴-4,6-二甲基吡啶鋅指蛋白703Elisa

文昌野野村氏 2-基-5-氯吡啶草酸Elisa

粉狀畢氏酵母 4-溴-2-氯甲苯肺炎衣原體Elisa

NCI-H647（人肺癌）（通過STR鑒定） 2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯梅螺旋體抗體Elisa

乳桿屬 雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮苯氨酸Elisa

短波單胞屬 N-Boc-4-羥基-L-脯氨酸甲酯(混旋)苯氨酸氫化Elisa

硫色曲霉 2-氯-5-甲氧基苯酸可溶性間粘附分子Elisa

解脂假絲酵母解脂變種 2-甲氧基-5-硝基-3-甲基吡啶可溶性間粘附分子Elisa

雞腿菇 2-硝基-5-溴苯組氨酸脫羧Elisa

紡織品  4-氨基偶氮苯   2-氯-5-氟三氟甲苯鈣釋放激活鈣通道蛋白Elisa

冬青節(jié)桿 5-氯-2-氟-三氟甲苯ORAIL鈣釋放激活鈣通道蛋白Elisa

葡萄座腔 芐基縮水甘油硫氧還蛋白-2Elisa

弗吉尼亞鏈霉 3-溴苯磺酰磷脂DElisa

谷氨酸棒桿 3-溴苯酸脂氧合Elisa

鹽漬芽孢桿屬 5-溴-2-嘧啶甲酸甲酯ERBB受體反饋抑制劑1Elisa