詳細介紹
商品介紹:
用途: 漿細胞核深藍色,胞質灰藍色。 儲存條件:室溫,避光,6個月 |
產品屬性:
中文名稱:天青A-伊紅染色液
英文名稱:
產品規格:2×50ml
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
芽孢桿菌二磷腺苷核糖基化因子鳥嘌呤核苷交換因子2抗體Human KLHDC4 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫試劑盒
孢吸水鏈霉菌α增強子結合蛋白1抗體Human KLHL32 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工II(GP-II)免疫試劑盒
荷葉蘑脊髓小腦共濟失調10抗體Human KLHL35 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒
多欄純潔桿菌蛋白激A錨定蛋白7抗體Human KLHL34 ELISA Kit小鼠糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種腺苷三磷結合盒轉運體12抗體Human KRT12 ELISA Kit小鼠糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
Arthrobacter腺苷三磷結合盒轉運體9抗體Human KLHL10 ELISA Kit小鼠糖皮質類固受體(GR)免疫試劑盒
弗雷德里克斯堡假單胞菌三磷腺苷結合盒轉運蛋白4抗體Human KRT33B ELISA Kit小鼠糖皮質激受體β(GR-β)免疫試劑盒
孢小克銀漢霉肌動蛋白結合蛋白LIM3抗體Human KRT34 ELISA Kit小鼠糖皮質激受體α(GR-α)免疫試劑盒
球孢白僵菌高爾基復合體相關蛋白1抗體Human KRT36 ELISA Kit小鼠糖類抗原199(CA199)免疫試劑盒
暗灰鏈霉菌乙酰羧化1ACCα抗體Human KLHL4 ELISA Kit小鼠糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒
釀酒酵母腺嘌呤核苷轉運蛋白1、2、3、4抗體Human KLHL9 ELISA Kit小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
芽孢桿菌去整合樣金屬蛋白12Human KLRF1 ELISA Kit小鼠糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒
大腸桿菌磷化乙酰羧化1ACCα抗體Human KRT40 ELISA Kit小鼠碳酐2(CA-2)免疫試劑盒
卡爾斯巴德唯鹽菌膜粘連蛋白2受體抗體Human KPNA1 ELISA Kit小鼠碳酐1(CA-1)免疫試劑盒
單孢共頭霉晚期糖基化終末產物特異性受體抗體Human KLRG1 ELISA Kit小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)免疫試劑盒
奇異球菌ADCK5蛋白抗體Human KLHL28 ELISA Kit小鼠胎盤生長因子(PLGF)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質量規格:38000~42000 mpa.s白介8試劑盒香葉
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質量規格:>99%,BR白介8試劑盒小檗紅堿硫酯
短桿菌Brevibacterium│sp. 質量規格:>99%,5N白介7試劑盒腺嘌呤
天青A-伊紅染色液孔狀短小莖點霉 2-氟苯基乙花生四烯酸5-脂氧合Elisa
香菇 2,6-二甲基-4-羥基苯甲色P450 1B1Elisa
黑青霉 2-(2-乙氧基苯氧基)溴乙烷角蛋白生長因子受體Elisa
固氮野野村氏 3-甲基-4-異基葉綠Elisa
異型薄孔 3,5-雙(三氟甲基)芐溴單酰基甘油酯Elisa
桔橙小單孢 4,6-二-2-三氟甲基嘧啶磷酸化酪氨酸激2Elisa
禾谷鐮刀 5-甲基煙酸α2肌動蛋白Elisa
釀酒酵母 3,5-二苯磺酰甘肽Elisa
盤長孢狀盤孢 3,4-二乙信號4AElisa
硝酸鹽還原海桿 3-N-異戊基-N-乙氨基-6-甲基-7-苯氨基熒烷去唾液酸糖蛋白受體Elisa
香栓孔 反式-4-甲基環己基異酸酯間羥去甲腎上腺Elisa
加州鏈霉 1--3,5-二甲氧基苯3-甲氧基腎上腺Elisa
木賊鐮孢 4-氟-2-甲酸沙門氏Elisa
嗜堿海螺 2-氟-5-甲酸血管緊張轉化1Elisa
膠紅酵母 1H-吲唑-6-羧酸D-乳糖Elisa