詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒
英文名稱:
產品規格:20T|50T|100T
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質中,形成聚合物,488nm 激發時的大發射波長為590nm,可以產生紅色熒光,在流式圖上表現為FL1和FL2雙陽性;在線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質中,此時JC-1為單體,488nm 激發時大發射波長為527nm,可以產生綠色熒光,形成流式圖中所有細胞FL1均為陽性。凋亡細胞則大多為FL1 單陽性。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。 通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降,同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。 線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)可以快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化,可以用于早期的細胞凋亡檢測。試劑盒染料與其他的陽離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123 相比,特異性更高,對線粒體膜電位變化的特異性高于質膜電位變化,對線粒體去極化檢測的檢測一致性更好;紅綠色熒光強度比率只受線粒體膜電位的變化,不受線粒體大小,形狀,密度的差異干擾;檢測靈敏度強,對細胞應激反應的微小異質性都能辨別; 儲存條件:JC-1-20℃避光保存,避免反復凍融。孵育緩沖液2-8℃保存。 有效期:一年。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
達拉濱磷酯英文名稱: Baclofen趨化因子受體D6抗體包裝5g
尿嘧啶,5-脲嘧啶,5-尿嘧啶英文名稱: Balofloxacin Dihydrate鈣穩態內質網蛋白抗體包裝1g
維司群英文名稱: Balofloxacin DihydrateCHES1蛋白抗體包裝5g
枸櫞托瑞米芬英文名稱: Bendamustine HCl哺乳動物性幾丁質抗體包裝100mg
紅杉,西曲依英文名稱: Bendamustine HCl幾丁質結構域蛋白1抗體包裝1g
環孢D英文名稱: Betamethasone嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體包裝25g
吉莫斯特;吉美嘧啶英文名稱: Betamethasone幾丁質1抗體包裝5g
吉西他濱英文名稱: Biapenem白抗原CD97 alpha 抗體包裝100mg
蝶呤英文名稱: Biapenem緊密連接蛋白2抗體包裝100mg
蝶呤二鈉鹽英文名稱: Bilibubin緊密連接蛋白7抗體包裝1g
啶鉑,吡鉑英文名稱: Bilibubin2號染色體開放閱讀框53抗體包裝5g
長春瑞賓/重長春瑞賓英文名稱: Bivalirudin TFA2號染色體開放閱讀框54抗體包裝25g
長春質堿英文名稱: Bimatoprost2號染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
卡鉑英文名稱: Bimatoprost2號染色體開放閱讀框61抗體包裝100g
卡博替尼 ;XL184英文名稱: Bleomycin A5 Hydrochloride 癌相關抗原抗體包裝25g
黃色長孢鏈霉菌Streptomyces│longisporoflavus 質量規格:含量>99.0%胰島樣因子3試劑盒異茴芹;Isopimpinellin(
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:>99.0%,BR胰島樣生長因子結合蛋白7試劑盒異土木香內酯;Isoalantolact
弧菌Vibrio│sp. 質量規格:HPLC>98%,標準品胰島樣生長因子結合蛋白5試劑盒7-乙基-10-羥基;7-Ethy
JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒銅綠假單胞 4-(三氟甲基l)芐基異酸酯ARHGAP4Elisa
奧氏蜜環 1-甲基-1H--5-LYNElisa
三葉草根瘤 叔丁基二甲基羥乙氧基硅烷a2-6半乳糖的唾液酸寡糖Elisa
哈薩克斯坦酵母屬 (S)-N-BOC-3-甲基啉α2,6-半乳糖唾液酸Elisa
少孢根霉 4-(2-甲氧基乙基)嗎啉三苯氧Elisa
膠孢 6-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶尿Elisa
圍小叢殼 1-[3-(二氟甲氧基)苯基]乙酮游離皮質Elisa
紅紫青霉 N-CBZ-2-甲胃動蛋白2Elisa
巴斯德畢赤酵母 6-氯-2-氟-3-甲氧基分泌性熱休克蛋白90Elisa
黃桿 2-氨基-5-甲氧基吡啶20羥二十碳四烯酸Elisa
牛瘟病 6-溴-2-氯-8-環戊基-5-甲基-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7(8H)-酮19羥二十碳四烯酸Elisa
蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 [1,3-雙(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亞基][[2-[2-氧代氧基]苯基]亞甲基]二氯西尼羅病抗體Elisa
Escherichia 1-(3,4-二基)哌西尼羅病抗原Elisa
水生黃桿 4-氯-3-甲5,6-EETElisa
金色鏈霉 2,4-二氯-5-氟8,9-EETElisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)