化工儀器網
詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Hoechst 33342 Stain solution(ready-to-use) | 10ml|50mL | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
本Hoechst 33342染色液為即用型，可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。 Hoechst 33342，也稱bisBenzimide H 33342或HOE 33342，是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33342染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33342也常用于普通的細胞核染色，或常規的DNA染色。Hoechst 33342的大激發波長為346nm，大發射波長為460nm;Hoechst 33342和雙鏈DNA結合后，大激發波長為350nm，大發射波長為461nm。 儲存條件：-20℃避光，有效期一年。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
比卡魯英文名稱： Atenolol結蛋白樣蛋白CGNL1抗體包裝10g
吡非尼，哌非尼英文名稱： Atorvastatin calcium生長調節蛋白CGREF1抗體包裝50g
吡美莫司;匹美莫司英文名稱： Atorvastatin calcium富含亮軟骨蛋白抗體包裝1g
達卡巴英文名稱： Azacitidine (5-Azacytidine)軟骨蛋白樣蛋白抗體包裝25g
達沙替尼（無）英文名稱： Azacitidine (5-Azacytidine)卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD3抗體包裝5g
達沙替尼一合物英文名稱： Azacitidine (5-Azacytidine)卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD10抗體包裝100g
地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷英文名稱： Azelastine HCl卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD7抗體包裝25g
多韋替尼乳鹽英文名稱： Azelastine HClATP依賴的解旋CHD1抗體包裝5g
多烯紫杉三合物英文名稱： Azithromycin染色質解旋DNA結合蛋白抗體包裝100g
多烯紫杉無/多西他賽英文名稱： Azithromycin染色質解旋DNA結合蛋白2抗體包裝25g
二磺拉帕替尼英文名稱： Aztreonam染色質解旋DNA結合蛋白3抗體包裝5g
二氫卟吩e6英文名稱： Aztreonam染色質解旋DNA結合蛋白Mi2β抗體包裝1g
凡德他尼英文名稱： Baccatin IIIATP依賴的解旋CHD6抗體包裝5g
反鉑英文名稱： Baccatin IIIATP依賴的解旋CHD7抗體包裝1g
達拉賓英文名稱： BaclofenATP依賴的解旋CHD8抗體包裝25g
: A208資源名稱: 淺紫灰鏈霉菌 質量規格：>99%,BR胰島抗體試劑盒楊梅苷;Myricitrin
易變鏈霉菌Streptomyces│mutabilis 質量規格：HPLC>99%,標準品胰島自身抗體試劑盒*泊苷;Etoposide
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規格：效價≥1300U/MG,BR胰島原試劑盒煙酰;Nicotinamide
Hoechst 33342 染色液(即用型)*蜜環 5-乙酰基嘧啶金屬肽含血小板反應蛋白4Elisa
波茨坦芽孢桿 壬二酸二(2-乙基己基)酯骨保護配體Elisa
新城疫病 2-氯-5-硝基嘧啶骨保護配體Elisa
藤黃檀根瘤 2--4-氟苯甲型肝炎病Elisa
大腸埃希氏桿 普侖司特丁型肝炎病Elisa
黑靈芝 [1,3-雙(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亞基][[2-(1-甲基-2-氧代氧基)苯基]亞單純皰疹病IElisa
釀酒酵母 4-氟間苯二酚單純皰疹病IIElisa
鏈霉 (R)-(-)-1-氨基茚鹽酸鹽單純皰疹病IIIElisa
短密青霉 DL-白氨酸瘤病Elisa
巨大芽胞桿 1-氯-4-丁烷金屬肽含血小板反應蛋白7Elisa
木層孔 2-吡啶丁酸金屬肽含血小板反應蛋白12Elisa
泡囊短波單胞 三己角蛋白18-M65Elisa
*蜜環 1,3,5-三(4-氨基苯氧基)苯血管緊張轉化2Elisa
節桿 2,5-二氯吡啶-4-甲RHOGElisa
長孢鏈霉 2-苯基二酰ARHGAP9Elisa
化工儀器網