以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
RAR/RXR核受體激動(dòng)劑 | Retinoic acid | 1mL(10mM)|100mg|500mg|1g|5g | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱(chēng):Retinoic acid 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|500mg|1g|5g Retinoic acid是一種天然的RAR/RXR核受體激動(dòng)劑。Retinoic acid也結(jié)合到PPARβ/δ,Kd為17nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):302-79-4 別名:ATRA;Tretinoin;Vitamin A acid;all-trans-Retinoic acid 純度:98.36% 分子量:300.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
新城疫病Cappuccino蛋白抗體Human VLDL(Very low-density lipoprotein) ELISA Kit人硫轉(zhuǎn)移pi基因(GSTpi)免疫試劑盒
黃桿菌前列腺過(guò)氧化物合成3抗體Human EN2(Homeobox protein engrailed-2) ELISA Kit人還原(GR)免疫試劑盒
大腸埃希菌補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1抗體Human NFKBIB(NF-kappa-B inhibitor beta) ELISA Kit人過(guò)氧化(GSH-Px)免疫試劑盒
米根霉羧肽CPN2抗體Human HPN(Serine protease hepsin) ELISA Kit人S轉(zhuǎn)移TT(GSTπ)免疫試劑盒
金針菇(黃)鈣/鈣調(diào)依賴(lài)蛋白激2D(CaMKIIδ)Human Rock-2(Rho Associated Coiled Coil Containing Protein Kinase 2) ELISA Kit人(GSH)免疫試劑盒
大腸埃希菌胞漿-5′-核苷-Ⅱ抗體Human CALU(Calumenin) ELISA Kit人谷酰轉(zhuǎn)移6抗體(IgM)免疫試劑盒
pCMV-GlucCD86抗體Human NTN1(Netrin-1) ELISA Kit人谷酰轉(zhuǎn)移2抗體(IgG)免疫試劑盒
圍小叢殼菌周期依賴(lài)性激1抗體Human APOA5(Apolipoprotein A-V) ELISA Kit人谷酰轉(zhuǎn)移2抗體(IgA)免疫試劑盒
粉色小菇周期依賴(lài)性激2抗體Human PRSS1(Trypsin-1) ELISA Kit人谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒
楚科奇海科維爾氏菌周期依賴(lài)性激4抗體Human NTN4(Netrin-4) ELISA Kit人谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒
豬鏈球菌II型周期依賴(lài)性激5抗體Human NTN1(Netrin-1) ELISA Kit人谷脫羧65(GAD65)抗體(IgG)免疫試劑盒
未定德研所菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框200抗體Human PRSS1(Trypsin-1) ELISA Kit人谷脫羧65(GAD65)免疫試劑盒
黑腐皮殼屬6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框223抗體Human APOA5(Apolipoprotein A-V) ELISA Kit人谷脫羧(GAD)免疫試劑盒
弗氏檸檬桿菌纖維抗體Human NMU(Neuromedin-U) ELISA Kit人谷受體(NMDAR)免疫試劑盒
釀酒酵母C型凝集4家族E抗體Human NTN4(Netrin-4) ELISA Kit人谷谷草轉(zhuǎn)2,線粒體(谷草轉(zhuǎn)2)(GOT2)免疫試劑盒
淺玫瑰鏈霉菌蕈堿型乙酰受體抗體Human IL2RB(Interleukin-2 receptor subunit beta) ELISA Kit人谷-半胱連接調(diào)節(jié)亞基(GCLM)免疫試劑盒
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品3,5-二-O-咖啡酰奎寧
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品蟛蜞菊內(nèi)酯
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品乙酰纈草三酯
RAR/RXR核受體激動(dòng)劑弗氏檸檬酸桿 1H,1H,2H,2H-全氟癸硫微管蛋白α3CElisa
石耳* 1-溴-4-氟萘二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Elisa
疣孢漆斑 2-(2-羥苯基)苯并噻唑脂肪酸轉(zhuǎn)位Elisa
長(zhǎng)毛木霉 3--4-甲p300乙酰轉(zhuǎn)移Elisa
粉紅單端孢霉 蘋(píng)果酸蘇尼替尼可溶性CD40分子Elisa
新平7317(平菇類(lèi)) Cbz-L-脯氨酸酰可溶性白介6受體Elisa
大腸埃希氏 5-甲基異噁唑-3-羧酸L-型鈣通道Elisa
金龜子綠僵 3,4-二氟苯甲甲基胞嘧啶雙加氧Elisa
白齒 2--4,6-二氨基-1,3,5-三核因子κB抑制蛋白Elisa
韋司梅擬盤(pán)多毛孢 4--D-苯氨酸甲酯鹽酸鹽離子通道Elisa
暗擬莖點(diǎn)霉 乙酸銫鎘-MTElisa
纖維単胞 4-(三氟甲基)苯甲酰肼緩慢激活的延遲整流通道Elisa
總狀毛霉 10,11-二氫-5H-二苯并[b,f]氮雜卓-5-甲酰血管生成樣蛋白8Elisa
米根霉 Boc-Gly-OSu吻Elisa
嗜熱鏈球 Boc-Ala-OSu鈣調(diào)依賴(lài)蛋白激IIαElisa