以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CDK7抑制劑 | THZ1 Hydrochloride | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:THZ1 Hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg THZ1Hydrochloride是一種有效的CDK7抑制劑,IC50值為3.2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 別名:CDK7 inhibitor 純度:98.70% 分子量:602.51 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
馬賽菌5號(hào)染色體開放閱讀框33抗體Human ARRB2(Beta-arrestin-2) ELISA Kit人和肽(copeptin)免疫試劑盒
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌9號(hào)染色體開放閱讀框89抗體Human ProHAMP(Hepcidin prohormone) ELISA Kit人漢坦病(HV)抗體(IgM)免疫試劑盒
擬雷氏日歸殼19號(hào)染色體開放閱讀框66抗體Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪激2(Tie-2)免疫試劑盒
陰溝腸桿菌21號(hào)染色體開放閱讀框55抗體Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪激1(Tie-1)免疫試劑盒
腸膜明串珠菌21號(hào)染色體開放閱讀框70抗體Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人含SET域4(setd4)免疫試劑盒
圓弧青霉胱抑A/半胱蛋白抑制劑A抗體Human CDKN2C(Cyclin-dependent kinase 4 inhibitor C) ELISA Kit人含patatin樣磷脂域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)免疫試劑盒
雜色曲霉8號(hào)染色體開放閱讀框4抗體Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人過氧化脂質(zhì)(LPO)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌CD73抗體Human EREG(Proepiregulin) ELISA Kit人過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)免疫試劑盒
拉氏西地西菌軸突相關(guān)粘附分子抗體Human ANXA2(Annexin A2) ELISA Kit人過氧化物體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)免疫試劑盒
蜂蜜接合酵母6型膠原蛋白α5抗體Human ACR(Acrosin) ELISA Kit人過氧化氫(CAT)免疫試劑盒
硬結(jié)節(jié)桿菌神經(jīng)粘附分子CALL抗體Human ANGPTL2(Angiopoietin-related protein 2) ELISA Kit人果糖二磷縮A(ALDOA)免疫試劑盒
谷棒桿菌中性粒殺菌蛋白BP30抗體Human TLR7(Toll-like receptor 7) ELISA Kit人果糖(FRA)免疫試劑盒
紅芝21號(hào)染色體開放閱讀框56抗體Human EREG(Proepiregulin) ELISA Kit人廣州管園線蟲抗體(IgM)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌T淋巴CD1抗體Human TLR7(Toll-like receptor 7) ELISA Kit人廣州管園線蟲抗體(IgG)免疫試劑盒
毛霉?fàn)罹砻菇堑鞍?/span>5抗體Human ACR(Acrosin) ELISA Kit人廣譜角蛋白(P-CK)免疫試劑盒
殼菌屬補(bǔ)體C9a抗體Human PROM1(Prominin-1) ELISA Kit人胱抑SN(CST1)免疫試劑盒
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:AR白果
空腸彎曲桿菌Campylobacter│jejuni 質(zhì)量規(guī)格:0.95白果新
魏斯氏菌Weissella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:IND平貝堿
CDK7抑制劑枯草芽孢桿 (S)-2-酮-6-羧酸p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子Elisa
放線纖維 麥芽七糖p53抑制劑Elisa
球形芽孢桿 5-溴-1-茚酮肺吸蟲抗體Elisa
孔雀石褐鏈霉 3,3'-二氟二苯甲酮鈣調(diào)蛋白Elisa
鼠李糖乳桿 1-壬炔D-乳糖Elisa
蠟樣芽孢桿 2--5-氟脂酰合成Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 亞硝酰硝酸釕(III)溶液檸檬酸合成Elisa
乳桿 2-氨基-6-(三氟甲基)吡啶CD36分子Elisa
紫丁香蘑 2-羥基-6-三氟脂肪Elisa
嗜熱鏈球 1-丁基-3-甲基咪唑硫酸鹽脂肪酸轉(zhuǎn)位Elisa
芽胞桿 4-甲硫基芐可溶性低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1Elisa
谷氨酸棒桿 2-溴-5-三氟甲苯尼克酰磷酸核糖轉(zhuǎn)移Elisa
釀酒酵母 1-(2-)-2-吡咯烷酮可溶性腫瘤壞死因子受體1Elisa
涎沫假絲酵母 5-溴-2-硝基三氟甲苯乳酸脫氫同工-XElisa
英諾克李斯特 7-氮雜-4-甲Ca2+ATPElisa