詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:甲基綠-派絡寧染色液
英文名稱:
產品規格:50ml|100ml
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
用途: 脫氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)染色 注意事項: 甲基綠經過提純,染色結果為:DNA呈綠色,RNA呈紅色 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
石榴干腐菌通用轉錄因子IIA樣因子抗體Human LIN28B ELISA Kit小鼠血管內皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒
小叢殼屬自噬相關蛋白4D抗體Human LHPP ELISA Kit小鼠血管內皮生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒
類谷糠乳桿菌自噬相關蛋白9A抗體Human LIN7C ELISA Kit小鼠血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌縮C抗體Human LILRA5 ELISA Kit小鼠血管內皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)免疫試劑盒
產氣莢膜梭菌 C型谷草轉抗體Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit小鼠血管內皮生長因子D(VEGF-D)免疫試劑盒
土生類諾卡氏菌三磷腺苷結合轉運蛋白G超家族成員5抗體Human LILRA4 ELISA Kit小鼠血管內皮生長因子C(VEGF-C)免疫試劑盒
樟疫霉三磷腺苷結合轉運蛋白G超家族成員8抗體Human LIMD2 ELISA Kit小鼠血管內皮生長因子B(VEGF-B)免疫試劑盒
黃色長孢鏈霉菌酰基脫氫長鏈抗體Human LILRB5 ELISA Kit小鼠血管內皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌酰基脫氫中鏈抗體Human LIMK1(LIM domain kinase 1) ELISA Kit小鼠血管緊張轉化2(ACE2)免疫試劑盒
地衣芽孢桿菌酰基脫氫短鏈抗體Human LIMS1 ELISA Kit小鼠血管緊張轉化(ACE)免疫試劑盒
白金針菇過氧化物酰基氧化1抗體Human LIMK2 ELISA Kit小鼠血管緊張原(aGT)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化凋亡信號調節激1抗體Human LGI3 ELISA Kit小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
白黃側耳轉化生長因子β誘導蛋白3抗體(半胱和絲富含核蛋白1)Human LGI2 ELISA Kit小鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫試劑盒
微小桿菌有絲分裂激A/B/C抗體Human LGI2 ELISA Kit小鼠血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌蛋白酪激ATK抗體Human LIMS1 ELISA Kit小鼠血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒
藤黃類諾卡氏菌長鏈脂肪連接1/2抗體Human LIMK2 ELISA Kit小鼠雄烯二(ASD)免疫試劑盒
左旋乳芽孢桿菌Bacillus│laevolacticus Nakayama and yanoshi 質量規格:>10 U/mg,BC瘢痕性天皰瘡抗體試劑盒*泊苷
中甸隔指孢Dactylella│zhongdianensis 質量規格:>98%,BR百日咳病抗體試劑盒鹽羅格列
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規格:>98%,BR百日咳病抗體試劑盒鹽吡格列
甲基綠-派絡寧染色液枯草芽孢桿 2--6-氟苯酸哇巴因Elisa
金黃色葡萄球(質控) 5-乙酰戊酸腸三葉因子3Elisa
菜豆間座殼 對甲苯磺酸鐵六水合物二肽基肽ⅧElisa
嗜血苯基桿 3-氨基-5-甲基吡唑二肽基肽ⅨElisa
隔離德沃斯氏 3,5-吡唑二甲酸組織蛋白BElisa
球孢白僵 4-氨基-5,6-二嘧啶固調節元件結合蛋白-1CElisa
燼灰土類芽孢桿 2,4,6-基-1,3-苯二乙酰Elisa
樹舌靈芝(平蓋靈芝) R-3-N-Boc-3-甲氨基NADH脫氫Elisa
枯草芽孢桿 4-苯氧基苯尿激Elisa
大腸埃希氏 2,2-二苯基環S-腺苷甲硫氨酸Elisa
Maritalea myrionectae 鋰糖原合成Elisa
杰丁畢赤酵母 草酸鋰糖原合成Elisa
白囊耙齒 正十二烷酸Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激2Elisa
灰略紅鏈霉 2--4,6-二增值核抗原Elisa
鮑氏桑黃 (R)-(+)-1-苯胃泌釋放肽抗體Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)