詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應靈敏度。同時,提供ROX作為內參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:動物源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:詳見說明書
貨號:GOY-M4675
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應時,只需將適當?shù)牧呀饣旌弦骸⒁铩Nase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
硫酸壯觀霉素四水化合物C14H8O4人胞質動力蛋白(CD)ELISA Kit
籠形D-赤-鞘氨醇-1-磷酸鹽C15H10O2人胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA Kit
籠形視黃酸C21H24O6人胞漿型磷脂酶A2-α(cPLA2-α)ELISA Kit
苯那敏N-氧化物二鹽酸C20H30O4人半乳糖凝集素7(Gal-7)ELISA Kit
吡格雷C15H8O7人半乳糖(Galactose)ELISA Kit
吡格雷硫酸鹽C18H18O6人板層素相關多肽2亞型α(TMPO)ELISA Kit
吡格雷酰基-β-D-葡萄糖苷酸C36H48O20人百日咳病抗體(IgM)ELISA Kit
吡格雷相關化合物 BC32H48O5人百日咳病抗體(IgA)ELISA Kit
代氟苯尼考類似物C37H42N2O6人白細胞酯酶(LE)ELISA Kit
氮平氮氧化合物C30H42O6人白細胞抗原DR(HLA-DR)ELISA Kit
地孕酮C47H74O18人白介素增強子結合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)ELISA Kit
米帕明N氧化物C20H30O3人白介素8(IL-8/CXCL8)自身抗體ELISA Kit
硝柳胺鹽C36H60O8人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA KitTRIVINYLMETHYLSILANE 水楊酸
OCIMENEChicken MMP-9 (Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit
動物源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒Triisopropyl phosphite 對羥基苯酸酯
SPIRO[2.4]HEPTA-4,6-DIENEChicken GOD (Glucose Oxidase) ELISA Kit
BEHENIC ACID METHYL ESTER 對羥基苯酸酯
RONIDAZOLEChicken BAFFR (B Cell Activating Factor Receptor) ELISA Kit
CORTICOSTERONE 對羥基苯酸酯
HIPPURYL-HIS-LEUChicken CNTNAP4 (Contactin Associated Protein 4) ELISA Kit
N-OCTADECANOPHENONE 維生素K3
EQUILINChicken MFAP4 (Microfibrillar Associated Protein 4) ELISA Kit
Dimethyloctadecyl[3-(trimethoxysilyl)propyl]ammonium chloride 茶皂素
MALTOTRIOSE HYDRATE 95Chicken PKCη (Protein Kinase C Eta ) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應用:基因表達調控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。