詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:PTEFb/CDK9抑制劑
英文名稱:BAY-1143572
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
BAY1143572是高效選擇性的PTEFb/CDK9抑制劑;抑制AML細胞系的增殖的中間IC50為385nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1414943-88-6 純度:98.0% 分子量:387.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
枯草芽孢桿菌SPG48蛋白抗體Anti-GRIN2A Antibody色P450氧化還原(CPR)
谷棒桿菌痙攣性截癱蛋白7/基質粘附調節蛋白抗體Anti-GRIN2A Antibody色P450家族成員7A1(CYP7A1)
大腸埃希氏菌非紅血影腦蛋白β2/spectrin β III抗體Anti-GRIN1 Antibody色P450家族成員3A4(CYP3A4)
白色短單胞菌腦磺基轉移樣蛋白4A1抗體Anti-GRIN2C Antibody色P450家族成員2E1(CYP2E1)
栗褐暗孔菌突觸結合蛋白14抗體Anti-GRK2 Antibody色P450家族成員26A1(CYP26A1)
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)TATA結合蛋白TBP抗體Anti-GRIN2B Antibody色P450家族成員24A1(CYP24A1)
污黑腐皮殼微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體Anti-GRIN2B Antibody色P450家族成員21B(CYP21B)
大豆慢生根瘤菌Tudor結構域蛋白TDRD3抗體Anti-GRK5 Antibody色P450家族成員1B1(CYP1B1)
乳菇屬線粒體內膜轉位8A/耳聾/肌張力障礙肽抗體Anti-GRK2 Antibody色P450家族成員1A2(CYP1A2)
耐久腸球菌跨膜蛋白158抗體Anti-GRK6 Antibody色P450家族成員1A1(CYP1A1)
緊密帚枝霉Tau微管蛋白激2抗體Anti-GRM2 Antibody色C氧化亞基Ⅳ亞型1(COX4I1)
塔斯曼尼亞弧菌谷酰轉6抗體Anti-GRX2/GLRX2 Antibody色C1(CYC1)
蘇云金芽胞桿菌跨膜蛋白59樣蛋白抗體Anti-GRM5 Antibody色C(CYCS)
枯草芽孢桿菌共濟失調蛋白8抗體Anti-GSK3A Antibody色b-561(CYB561)
果生鏈核盤菌TBR1蛋白抗體Anti-GSK3A Antibody色b-245β肽(CYBβ)
馬克斯克魯維酵母感光轉錄因子TULP3抗體Anti-GSK3A Antibody色b(COB)
鈉通道蛋白10α抗體兩歧雙歧桿菌人腹膜毛細血管內皮細胞
鈉通道蛋白11α抗體普通高溫放線菌人腎上皮細胞
絲蛋白抑制劑B12抗體惡臭萊西氏菌人腎小球內皮細胞
絲蛋白抑制劑B10抗體含羞草結瘤伯克霍爾德氏菌人膀胱上皮細胞
PTEFb/CDK9抑制劑哈茨木霉 2-氟-6-(三氟甲基)苯甲異檸檬酸脫氫Elisa
中慢生華癸根瘤 氨氮/NH3-N血鈣Elisa
枯草芽孢桿 氨/NH3肉堿脂酰轉移IElisa
蒼白枝孢 2--5-硝苯糞臭Elisa
勝利油田鹽單胞 釔/Y雙氫睪酮Elisa
枯草芽孢桿 1,4-雙[2-(2-基)乙烯基]苯去氫表雄酮Elisa
聚貪噬 镥/Lu旋毛蟲Elisa
枯草芽胞桿 鐿/Yb囊蟲Elisa
解淀粉芽孢桿 二苯并噻吩3-甲基Elisa
摩氏變形 銩/Tm生長停滯特異性蛋白6Elisa
金黃殼囊孢 氧芴急性期蛋白Elisa
淺紫鏈霉 鉺/Er超敏C反應蛋白Elisa
酵母 鈥/Ho黃曲霉B1Elisa
米曲霉 2--4,6-二甲氧基嘧啶胰多肽Elisa
大腸埃希氏 鏑/Dy腺病Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)