詳細介紹
商品介紹:
英文名稱:PX-478 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg PX-478是一種缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)抑制劑,在常氧和缺氧條件下對各種癌細胞系具有細胞毒性,IC50為20-30μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:685898-44-6 純度:98.0% 分子量:394.12 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:缺氧誘導因子-1α抑制劑(HIF-1α)(PX-478)
英文名稱:PX-478
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
香菇延伸突觸蛋白3抗體Human ZNF253 ELISA Kit雞熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌原纖維蛋白2抗體Human ZNF24 ELISA Kit雞熱休克蛋白27(HSP-27)免疫試劑盒
滑菇尤文肉瘤FLI1蛋白抗體Human ZNF251 ELISA Kit雞熱休克蛋白20(HSP-20)免疫試劑盒
鏈霉菌巖藻糖轉移1抗體Human ZNF256 ELISA Kit雞去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒
土曲霉凋亡調節蛋白δ+γ抗體Human L1CAM(Neural cell adhesion molecule L1) ELISA Kit雞前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
球毛殼菌叉頭蛋白O1/O3/O4抗體Human ZMAT2 ELISA Kit雞前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
嬰兒配方乳粉化物 微管相關蛋白FAM82B抗體Human ZIC4 ELISA Kit雞皮質/腎上腺(CORT)免疫試劑盒
越南芽孢桿菌纖維蛋白原A鏈抗體Human ZNF134 ELISA Kit雞免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒
鼠李糖乳桿菌FAS凋亡抑制分子1抗體Human PCGF6(Polycomb group RING finger protein 6) ELISA Kit雞免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
魯氏不動桿菌FAS凋亡抑制分子2Human ZKSCAN3 ELISA Kit雞免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
針葉樹散斑殼表皮表面抗原1抗體Human ZIM3 ELISA Kit雞免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
固氮菌凝血因子9抗體Human ZNF140 ELISA Kit雞免疫核糖核(Irna)免疫試劑盒
粗皮馬勃凝血因子10抗體Human ZIP4 ELISA Kit雞馬立克氏病病(MDV)抗體(IgM)免疫試劑盒
釀酒酵母凝血因子11輕鏈抗體Human ZNF143 ELISA Kit雞馬立克氏病病(MDV)抗體(IgG)免疫試劑盒
紫紅曲霉凝血因子12重鏈抗體Human ZIP7 ELISA Kit雞卵轉鐵蛋白(OT)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌FIGNL1蛋白抗體Human ZKSCAN1 ELISA Kit雞卵清白蛋白免疫試劑盒
肺炎克雷伯菌肺炎亞種Klebsiella│pneumoniae 質量規格:1000μg/ml,溶劑:齊墩果-3-O-β-D葡萄糖( 1→3
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種Bacillus│amyloliquefaciens subsp. amyloliquefaciens 質量規格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3黃花敗醬甙C;牡丹草苷B
煙曲霉Aspergillus│fumigatus 質量規格:100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液五味子酚
缺氧誘導因子-1α抑制劑(HIF-1α)(PX-478)紅細 Boc-O-芐基-D-蘇氨抗酸性磷酸Elisa
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