詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CCT251545 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
CCT251545是一種有效的WNT抑制劑,IC50值為5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1661839-45-7 純度:98.48% 分子量:421.92 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
光帽鱗傘絲/蘇蛋白激17A/DAP凋亡誘導蛋白激1抗體Anti-GRB14 Antibody周期D1(CCND1)
里亞氏須腹菌碳氫鈉協同轉運蛋白4-A7抗體Anti-GRB2 Antibody周期C(CCNC)
蠟狀芽孢桿菌微管卷曲蛋白SYNC抗體Anti-GRB10 Antibody周期B3(CCNB3)
角微菌磷化SH2結構含磷肌SHIP1抗體Anti-GRB7 Antibody周期B2(CCNB2)
腐皮鐮孢菌磷化沉默調節蛋白1抗體Anti-GRB7 Antibody周期B(CCNB)
長枝木霉線粒體促凋亡蛋白抗體Anti-GREM1 Antibody周期A1(CCNA1)
鏈球菌(不定種)墨蝶蛉還原抗體Anti-GREM1 Antibody周期A(CCNA)
北方蜜環菌核突觸蛋白α+β抗體Anti-GRIA1 Antibody粘附分子1(CADM1)
枯草芽孢桿菌內質網脂質轉運相關蛋白2抗體Anti-GRIA1 Antibody(PB0201)因子信號轉導抑制因子3(SOCS3)
糙孢籃狀菌絲消旋Anti-GRIA3 Antibody因子信號轉導抑制因子1(SOCS1)
大腸埃希氏菌鈣結合樣蛋白/神經內分泌腫瘤標記物抗體Anti-GRIA4 Antibody因子受體樣因子1(CRLF1)
匍枝根霉(黑根霉)絲/蘇蛋白激SRPK7抗體Anti-GRIA3 Antibody維甲結合蛋白2(CRABP2)
假絲酵母屬磺基葡糖硫抗體Anti-GRIA2 Antibody(PB0202)外信號調節激2(ERK2)
黑柄多孔菌免疫球蛋白μ鏈結合蛋白2抗體Anti-GRID2 Antibody外信號調節激1(ERK1)
柱枝雙孢霉痙攣性截癱相關蛋白21抗體Anti-GRIN1 Antibody外基質金屬蛋白誘導因子(EMMPRIN)
產黃青霉G蛋白結合蛋白3抗體Anti-GRIK1 Antibody外基質蛋白1(ECM1)
絲/蘇/酪激STYK1抗體腸沙門氏菌腸亞種人臍動脈內皮細胞
絲/蘇蛋白激SRPK1抗體摩氏摩根氏菌人主動脈內皮細胞
導向蛋白3B抗體腸沙門氏菌腸亞種旺茲沃思血清型人冠狀動脈內皮細胞
硫酯1抗體熱生腫塊芽孢桿菌人臍動脈平滑肌細胞
WNT抑制劑(CCT251545)委內瑞拉鏈霉 聯氨/N2H4肉絳蟲IgE抗體Elisa
白僵 亞硝酸鹽氮/NO2-N衣原體抗體Elisa
解脂假絲酵母 五苯硫酚抗酸性Elisa
根瘤 亞硝酸根(亞硝酸鹽)/NO2-抗酸性磷酸5bElisa
溴離子(溴化物)/Br-I型膠原交聯羧基端肽Elisa
枯草芽孢桿 呋喃-2-酸游離甲狀腺Elisa
鴨疫里氏桿 總氮/N游離狀腺原氨酸Elisa
枯草芽孢桿 硝酸鹽氮/NO3-N三磷酸腺苷Elisa
枯草芽孢桿 4'-代苯乙酮幽門螺桿相關基因蛋白AElisa
假單胞 銣/Rb磷酸糖異構Elisa
根瘤 磷酸根(磷酸鹽)/PO43-雌酮Elisa
米根霉 4-氨基-1-丁神經酰Elisa
雞腸球 離子(化物)/I-腎Elisa
黃桿 Fmoc-L-瓜氨酸硫酸肝Elisa
炭疽芽孢桿 銨離子/NH4+鈣調磷酸Elisa