公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BET bromodomain抑制劑(CPI-203)
英文名稱:CPI-203
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
CPI-203是一種有效的,選擇性的,細(xì)胞通透的BET bromodomain抑制劑,IC50值約為37nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1446144-04-2 純度:99.38% 分子量:399.9 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
枯草芽孢桿菌羊抗小鼠IgG抗血清Anti-RAB27A Antibody激肽釋放11(KLK11)
華根霉羊抗小鼠IgM抗血清Anti-RAB3A Antibody激肽釋放10(KLK10)
尖孢鐮刀菌羊抗大鼠IgG抗血清Anti-RAB3C Antibody激肽釋放1(KLK1)
頭狀雙足囊菌羊抗豚鼠IgG抗血清Anti-RAB5A Antibody激敏感性脂肪(LIPE)
戴氏西地西菌羊抗人IgG抗血清Anti-RAB3GAP2 Antibody激活受體樣激1(ALK1)
粟酒裂殖酵母羊抗人IgM抗血清Anti-RAB5A Antibody(PB0839)激活B(ACVB)
雙孢蘑菇羊抗雞IgG抗血清Anti-RAB6A Antibody激活A(yù)受體ⅡA(ACVR2A)
蠟狀芽孢桿菌小鼠抗人IgG腹水Anti-Rab9/RAB9A Antibody激活A(yù)受體Ⅰ(ACVR1)
大腸埃希菌小鼠抗羊IgG腹水Anti-RAB8A Antibody激活A(yù)B(ACVAB)
谷棒桿菌小鼠抗兔IgG腹水Anti-RAB7A Antibody激活A(yù)(ACVA)
鏈霉菌小鼠抗大鼠IgG腹水Anti-RAB9A Antibody激活蛋白C(APC)
平臍儒孢菌小鼠抗牛IgG腹水Anti-RAB9A Antibody激活STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)
硬水黃桿菌兔抗親和抗血清Anti-RAC1 Antibody畸胎瘤衍生生長(zhǎng)因子1(TDGF1)
卷曲鏈霉菌兔抗生物抗血清Anti-RAD51 Antibody(PB0367)基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白8(MXRA8)
膠孢兔抗牛IgM抗血清Anti-Rad17 Antibody基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白5(MXRA5)
Sandarakinorhabdus兔抗雞IgG抗血清Anti-RAD51 Antibody基質(zhì)衍生因子4(SDF4)
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因H4抗體散囊菌屬小鼠腎管狀上皮細(xì)胞提取物
神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體扣囊擬內(nèi)孢霉小鼠輸尿管上皮細(xì)胞提取物
背板膠質(zhì)乙酰酯抗體擬青霉屬小鼠尿道上皮細(xì)胞提取物
神經(jīng)細(xì)胞PAS結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體紙葡萄穗霉小鼠腎成纖維細(xì)胞提取物
BET bromodomain抑制劑(CPI-203)交織木霉 異鉤藤堿酸
葡萄座腔 (+)-異胡薄荷
節(jié)桿 鹽酸藥根堿
病研所芽孢桿 堪非3,4'-二-O-甲
小孢根霉華變種 掌葉半夏堿戊
棘孢青霉 氧基白屈菜季銨堿
類香味 脫氧阿枯明
農(nóng)研所芽孢桿 異魚(yú)藤色烯異黃酮
玫瑰色野野村氏 雪松
地科維爾氏 原千金藤那布任堿
焦曲霉 異葉波羅蜜環(huán)黃酮
野土地桿 紫杉脂
嚙蝕艾肯 漆黃; 紫鉚
魯錐梗孢 植酮
黃曲霉 烏沙苷元洋地黃苷