詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
MTT | 250mg | 1~3天 |
商品介紹:
噻唑蘭(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT),也稱作溴化噻唑藍四氮唑,是一種黃色染料,已經普遍替代傳統的臺盼藍染色法或者放射性同位素插入法,用來檢測細胞的活力,細胞增殖以及細胞毒性分析。檢測原理在于:MTT是一種可接受氫離子的化合物染料,帶正電荷,具有細胞膜滲透性。活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠將外源進入的MTT還原成為水不溶性的深藍色MTT-甲臜結晶,而死細胞不具有此功能。甲臜結晶是不能穿透細胞膜,因此沉積在處于增殖且未受損傷的細胞內。甲臜結晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來,酶標儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細胞數目成正比,用以評估細胞存活狀況。 MTT也可用作免疫組化/細胞化學染色試劑,也可用來檢測NAD。MTT被快速還原成甲臜后,能夠螯合鎳,銅和鈷。鈷螯合物可參與機體氧化系統。 CAS:298-93-1 分子式:C18H16N5SBr 外觀:淡黃色至橙色粉末 分子量:414.3 純度:≥98% 熔點:187℃ 溶解性:溶于水,甲醇 儲存條件:4℃ |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
泛(Ub)英文名稱:Ub ELISA Kit原癌基因CD39樣蛋白4抗體包裝100g
泛醌C還原核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)英文名稱:UQCRC2 ELISA Kit膠原樣蛋白抗體包裝500g
翻譯調節腫瘤蛋白1(TPT1)英文名稱:TPT1 ELISA Kit腫瘤易感性候選基因5抗體包裝5g
法尼酯X受體(FXR)英文名稱:FXR ELISA Kit鈣調蛋白激激β抗體包裝1g
二酰基甘油(DAG)英文名稱:DAG ELISA Kit中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體包裝5g
二酰甘油-O-酰基轉移同源物1(DGAT1)英文名稱:DGAT1 ELISA Kit分裂周期相關蛋白JPO2抗體包裝100g
二肽基肽Ⅳ(DPP4)英文名稱:DPP4 ELISA Kit半胱蛋白-2抗體包裝25g
二肽基肽9(DPP9)英文名稱:DPP9 ELISA Kit7號染色體開放閱讀框63抗體包裝25g
二肽基肽8(DPP8)英文名稱:DPP8 ELISA KitCD2結合蛋白3抗體包裝5g
二氫乳清脫氫(DHODH)英文名稱:DHODH ELISA Kit膠原三股螺旋重復蛋白1抗體包裝5g
二氫嘧啶脫氫(DPYD)英文名稱:DPYD ELISA Kit20號染色體開放閱讀框72抗體包裝100g
二氫硫辛轉乙酰基(DLAT)英文名稱:DLAT ELISA Kit2號染色體開放閱讀框6抗體包裝25g
二氫硫辛脫氫(DLD)英文名稱:DLD ELISA KitCD318抗體包裝5g
二級淋巴組織趨化因子(SLC)英文名稱:SLC ELISA Kit著絲粒蛋白B抗體包裝25g
兒茶酚-O-基轉移(COMT)英文名稱:COMT ELISA Kit1號染色體開放閱讀框111抗體包裝5g
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質量規格:HPLC≥98%,標準品孕受體試劑盒延胡索;Corydaline
傳染性法氏囊病病毒禽雙RNA病毒屬│ 質量規格:USP,進分sigmaD8809 孕和adipoQ 受體家族成員Ⅶ試劑盒月桂氮卓;Laurocapram
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>99.5%,BR,可用于培養孕激誘導阻斷因子試劑盒油;cis-9-Octadecenoi
MTT(噻唑蘭)多色節桿 2-[2-(3-甲氧基苯)乙烯]苯酚膜結合HLA-G亞型Elisa
皮氏羅爾斯通氏 3-環戊烯-1-膜結合HLA-E亞型Elisa
產氣莢膜梭 D型 苯氧基乙酸酐艱難梭AElisa
暗黃紫色小單孢 鉻酸鋰鞘氨激Elisa
Pseudomonas 2-吡啶基硫脲酸性神經鞘磷脂Elisa
總狀毛霉原變型 甘氨酸錳二羥環氧苯并芘Elisa
釀酒酵母 6-氟煙酸甲酯神經鞘磷脂Elisa
釀酒酵母 2-氯乙氧基乙酸乙酯葡萄糖-6-磷酸Elisa
巴西固氮螺 N,N-二乙基對苯二草酸鹽霍亂B亞基Elisa
咖啡擬盤多毛孢 H-D-Phe-Pna布病Elisa
少疣曲霉 反式-4-羥基-D-脯氨酸鹽酸鹽磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
冷溫木拉克酵母 恩替卡韋骨特異性堿性磷酸Elisa
蘇云金芽胞桿 草酸鐵銨β-防御118Elisa
枯草芽孢桿 N-乙酰基-D-半乳糖脫氧砒啶啉Elisa
戊糖片球 3--4-羧酸乙酯過氧亞硝基陰離子Elisa