詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
5-Fluorouracil | 1ml|2ml | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:5-Fluorouracil 產品規格:1ml|2ml 濃度:10mg/mL in NS 分子式:C4H3FN2O2 分子量:130.08 純度:≥99%(HPLC) 儲存:4℃,有效期12個月 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
立枯絲核菌1號染色體開放閱讀框67抗體Human EYA2 ELISA Kit兔子基質金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒
大腸埃希菌1號染色體開放閱讀框83抗體Human EYA4 ELISA Kit兔子基質金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒
無色殼囊孢富含半胱分泌蛋白3抗體Human EZH1 ELISA Kit兔子基質金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒
角磷灰鵝膏菌腫瘤/抗原26抗體Human FAM101A ELISA Kit兔子肌鈣蛋白C(TnC)免疫試劑盒
匍匐曲霉周期蛋白依賴性激抑制劑2C抗體Human FAM111B ELISA Kit兔子黃體生成(LH)免疫試劑盒
紋黑蛋巢Cullin2抗體Human EYA1 ELISA Kit兔子環磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌鈣調蛋白激CaMK1D抗體Human EYA3 ELISA Kit兔子核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)免疫試劑盒
長枝木霉CHX10蛋白抗體Human EYA2 ELISA Kit兔子核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒
腹膜蒼黃球菌畸胎瘤衍化生長因子單克抗體(C端)Human EXT2 ELISA Kit兔子胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒
球孢白僵菌周期蛋白依賴性激抑制劑2B抗體Human FAM105A ELISA Kit兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫試劑盒
多殺性巴氏桿菌*畸胎瘤衍化生長因子單克抗體Human EXOC1 ELISA Kit兔子骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒
鮑氏不動桿菌泛連接蛋白CHFR抗體Human FAM105A ELISA Kit兔子骨膠原交聯/Ⅰ型膠原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)免疫試劑盒
釀酒酵母Cullin1抗體Human EXOC5 ELISA Kit兔子骨膠原交聯(Cr)免疫試劑盒
類干酪乳桿菌肌動蛋白結合蛋白CFL抗體Human EXOC6 ELISA Kit兔子骨堿性磷(BALP)免疫試劑盒
斑玉蕈軟骨衍生形態發生蛋白1抗體Human EXOC6B ELISA Kit兔子還原(GR)免疫試劑盒
泡盛曲霉β-酪蛋白抗體Human EXOG ELISA Kit兔子過氧化(GSH-Px)免疫試劑盒
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質量規格:>98%,BRToll樣受體3試劑盒牛磺熊去氧膽
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規格:BRToll樣受體2試劑盒牛磺
土壤黃色單胞菌Luteimonas│terricola 質量規格:BRToll樣受體1試劑盒米力農
5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil)馬爾他布魯氏 3-氟鄰苯二甲酸酐反狀腺原氨酸Elisa
大腸埃希氏桿 茶堿乙酸泛Elisa
傘形卷霉 3,6-二氟鄰苯二甲酸泛C末端水解L1Elisa
大腸埃希 4-氟苯甲酰乙酸甲酯芳香族L-氨基酸脫羧Elisa
土壤德沃斯氏 2-溴苯乙肥大類胰蛋白Elisa
居真細 N,N′-二苯基-N,N′-(3-基)-1,1′-聯苯-4,4′-二肥胖抑制Elisa
Compostimonas 6-溴吡啶-2-酸頻哪酯肺表面活性物質相關蛋白AElisa
大腸埃希氏桿 巰基七甘單甲肺表面活性物質相關蛋白BElisa
諾卡氏 二溴二酸二乙酯肺表面活性物質相關蛋白CElisa
矩圓黑盤孢 溴氟甲基膦酸二乙酯肺表面活性物質相關蛋白DElisa
銅綠假單胞 1-烯基-3-甲基化咪唑分泌成分Elisa
淀粉產色鏈霉 1-乙基-3-甲基化咪唑鎓分泌型卷曲相關蛋白1Elisa
Bacillus aryabhattai 1,3-二溴-5-(易)分泌型球蛋白AElisa
猴頭 1-乙基-3-甲基咪唑溴鹽封閉蛋白1Elisa
黃曲霉 1-丁基-3-甲基化咪唑鎓復制蛋白AElisa