詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TAK-960 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
TAK-960是一種有效的,選擇性的polo-like kinase1(PLK1)抑制劑,在3μM ATP的條件下,IC50值為1.5nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1137868-52-0 純度:99.22% 分子量:561.6 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
香菇核突觸蛋白-α抗體(N端)Anti-PSMA2 Antibody間隙連接蛋白40(CX40)
香蕉5脂氧合激活蛋白抗體Anti-PSEN2 Antibody間隙連接蛋白37(CX37)
擬莖點霉14-3-3 protein ζ/δ抗體Anti-PSMA4 Antibody間隙連接蛋白31(CX31)
巨型艾美耳球蟲硫軟骨多糖核心蛋白抗體Anti-PSMA1 Antibody(PB1143)間隙連接蛋白26(CX26)
釀酒酵母膽固酰基轉移1抗體Anti-PSMA3 Antibody(PB1145)間生蛋白1(MSGN1)
青霉屬沉默調節蛋白5抗體Anti-PSME2 Antibody假尿苷合7(PUS7)
平菇葡萄糖轉運蛋白4增強因子抗體Anti-PTBP1 Antibody假尿苷合3(PUS3)
卷柄根霉脂肪轉運蛋白6抗體Anti-PTBP2 Antibody假尿苷合10(PUS10)
非洲馬瘟病(II型)電壓門控鈉通道5α抗體Anti-PTCH1 Antibody假尿苷合1(PUS1)
托姆青霉因子信號傳導抑制蛋白2抗體Anti-PTCH2 Antibody中間小電導鈣激活通道蛋白亞家族N成員2(KCNN2)
綠色木霉S100A1抗體Anti-PTCH2 Antibody協同轉運蛋白4(KCC4)
特臘帕尼鹽紅菌磷鈉協同轉運蛋白抗體Anti-PTEN Antibody協同轉運蛋白3(KCC3)
茶樹菇因子信號傳導抑制蛋白3抗體Anti-PTCRA Antibody協同轉運蛋白2(KCC2)
綠木霉信號轉導分子Smad-2抗體Anti-PTEN Antibody蛋白(KALRN)
托姆青霉陰離子轉運蛋白-1抗體Anti-PTF1A Antibody甲狀腺轉錄因子1(TITF1)
松口蘑泛連接Siah2Anti-PTGER1 Antibody甲狀腺受體β(THRβ)
N-乙酰轉移8B抗體斯氏普羅威登斯菌小鼠淋巴血管內皮細胞提取物
NOMO蛋白抗體Patulibacteramericanus小鼠腦動脈血管內皮細胞提取物
線粒體復合物NDUFS7蛋白抗體新疆溶桿菌小鼠淋巴內皮細胞提取物
尼曼匹克C2前體蛋白抗體耳葡萄球菌小鼠腸巨噬細胞提取物
polo-like kinase1(PLK1)抑制劑(TAK-960)擬郎比可假絲酵母 乙酰桉樹
腸桿屬 異紅花八角
圈卷產色鏈霉 梓甙
灰綠犁頭霉 野馬追內酯K
類芽孢桿 9-羥基-13E-賴百當烯-15-酸
單胞 異木香酸甲酯
異常威克漢姆酵母 Cuniloside B
異常漢遜酵母 七葉膽皂甙
木霉 雙去甲氧基姜黃
假單胞 (+)-花旗松
紅色鹽幾何形 防己諾林堿; 粉防己乙; 漢防己乙; 去甲粉防己堿
構巢曲霉 DL-薄荷
玫瑰單胞 1-咖啡酰奎寧酸
釀酒酵母 6-(beta-D-吡喃葡萄糖氧基)水楊酸甲酯
蘑菇屬 靈芝萜酮二