詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
SGX-523 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
SGX-523是Met抑制劑,IC50為4nM,對BRAFV599E,c-Raf,Abl和p38α無活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1022150-57-7 純度:99.21% 分子量:359.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
長雙歧桿菌生長抑抗體Anti-PRKCB Antibody角蛋白7(KRT7)
釀酒酵母胚胎干關鍵蛋白抗體Anti-PRKCD Antibody角蛋白6C(KRT6C)
Edaphobacter sp.生長抑受體4抗體Anti-PRKCD Antibody角蛋白6B(KRT6B)
根瘤菌屬Smad4抗體Anti-PRKCE Antibody角蛋白6A(KRT6A)
膠孢Smad7抗體Anti-PRKCE Antibody(PB0357)角蛋白5(KRT5)
醋桿菌屬Shh信號轉導通路膜蛋白受體抗體Anti-PRKCH Antibody角蛋白40(KRT40)
Corynebacterium variabile corrig. (Müller ) Collins 前列腺跨膜上皮1抗原抗體Anti-PRKCG Antibody角蛋白4(KRT4)
病研所芽孢桿菌雌激調節蛋白LIV1/鋅轉運蛋白抗體Anti-PRKCH Antibody(PB0591)角蛋白33A(KRT33A)
米曲霉平展變種垂體腫瘤轉化基因抗體Anti-PRKDC Antibody角蛋白3(KRT3)
姬松茸1號*豬水腫(O139)菌體蛋白抗體Anti-PRKDC Antibody角蛋白20(KRT20)
木霉S-腺苷蛋脫羧抗體Anti-PRKCI Antibody(PB0358)角蛋白2(KRT2)
尖鐮孢5-羥色受體2B抗體Anti-PRKN Antibody(PB0342)角蛋白19(KRT19)
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS18視黃激活基因8抗體Anti-PRL Antibody角蛋白18(KRT18)
平滑肌肌球蛋白重鏈抗體Anti-PRL Antibody角蛋白17(KRT17)
蘇云金芽胞桿菌以色列亞種新型血小板相關血管內皮分泌蛋白SCUBE1抗體Anti-PRLR Antibody角蛋白16(KRT16)
Chitinophaga sp.雙鏈RNA結合蛋白Staufen抗體Anti-PRL Antibody角蛋白15(KRT15)
神經細胞粘附蛋白NGN抗體坐皮膚球菌小鼠腎小球內皮細胞提取物
神經細胞蛋白Nav1抗體Xanthomonascampestris小鼠心肌細胞提取物
軸索過度生長抑制因子B受體抗體震顫纖維單胞菌小鼠冠狀動脈內皮細胞提取物
神經源性神經營養因子抗體無二檸檬桿菌小鼠主動脈內皮細胞提取物
Met抑制劑(SGX-523)弓形蟲(ZS株) 雌三 3-葡萄糖酸苷10kDa熱休克蛋白1Elisa
栗疫 Hugorosenone緊密連接蛋白Elisa
卷枝毛霉卷枝變型 雌三 3,17-二已酸酯組織谷氨酰轉移Elisa
杏鮑菇 Lamalbid檸檬酸裂解Elisa
厚環粘蓋牛肝(可定) Lamalbid糖原合成激3βElisa
日本根霉 雌三 17-硫酸酯乙酰羧化Elisa
鴨肉 霉、土霉、金霉、四環 Dihydrobonducellin檸檬酸裂解Elisa
南擬酵母 雌三 3-硫酸酯糖原合成激3βElisa
產黃青霉 Glucopyranoside,(3beta,25R)-17-hydroxyspirost-5-enATP-檸檬酸裂解Elisa
瓶孢野野村氏 高香草酸硫酸鹽色P4502D6Elisa
賴氨酸芽胞桿屬 Psoracorylifol C色P4502E1Elisa
釀酒酵母橢圓變種 3-硝基-L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽色P450家族成員2C19Elisa
Winogradskyella eximia 11β-羥基色P4503A4Elisa
藍微褐鏈霉 鹽酸普拉克索色P4501A2Elisa
松柏假單胞閃光亞種 決奈達隆磷酸肌3激Elisa