詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
DG051 | 1mL(10mM)|1mg|5mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
DG051是一種有效的白三烯A4水解酶(leukotriene A4hydrolase)抑制劑,IC50為47nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:929915-58-2 純度:99.65% 分子式:C??H??Cl?NO? 分子量:426.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
中國漢納酵母鋅指蛋白103抗體Human POLM ELISA Kit血管緊張1-7(Ang1-7)ELISA Kit
沙福芽孢桿菌纖維母生長因子7抗體Human POLR1C ELISA Kit血管緊張(ANG)ELISA Kit
大豆慢生根瘤菌肺Kruppel樣因子抗體Human POLR1A ELISA Kit血管活性肽抑制劑(VPI)ELISA Kit
希瓦氏菌*激肽釋放5抗體Human POLR2J ELISA Kit血管活性腸肽(VIP)ELISA Kit
白乳菇激肽釋放13抗體Human POLE3 ELISA Kit血管動蛋白(AMOT)ELISA Kit
Termitomyces bulborhizus 激肽釋放15抗體Human POLG2 ELISA Kit旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)ELISA Kit
白假絲酵母激肽釋放2抗體Human POLI ELISA Kit溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA Kit
米根霉激肽釋放12抗體Human POLM ELISA Kit雄烯二(ASD)ELISA Kit
雞、滑液支原體(-)陰性血清G蛋白偶聯受體54抗體Human POLR1A ELISA Kit雄激受體(AR)ELISA Kit
耐冷冷桿菌驅動蛋白家族KIF17抗體Human POLR1C ELISA Kit雄激結合蛋白(ABP)ELISA Kit
臭曲霉轉錄因子KLF9抗體Human POLR1D ELISA Kit胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA Kit
皮狀絲孢酵母上皮特異性蛋白1抗體Human POLR1E ELISA Kit胸腺五肽(TP-5)ELISA Kit
西藏木霉磷化離子通道蛋白Kv3.1抗體Human POLG2 ELISA Kit胸腺肽β4(Thymosin β4)ELISA Kit
科羅拉多擬無枝菌周期基因1蛋白抗體Human POLI ELISA Kit胸腺肽α1(Thymosin α1)ELISA Kit
粒狀青霉驅動蛋白KIF5B抗體Human PNRC1 ELISA Kit胸腺肽(Thymosin)ELISA Kit
木耳kelch樣蛋白13抗體Human LTC4S(Leukotriene C4 synthase) ELISA Kit胸腺嘧啶核苷磷化(TP)ELISA Kit
不解糖假蒼白桿菌Pseudochrobactrum│asaccharolyticum 質量規格:>98.0%(T)高三尖杉酯堿
哲拉什黃桿菌Flavobacterium│degerlachei 質量規格:>95.0%(GC)(T)化兩面針堿
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>98.0%(GC)血根堿
白三烯A4水解酶抑制劑(DG051)CGRP CGRP降鈣因相關肽抗體山梨 >99.0%(T)
ChAT ChAT膽酰轉移抗體2-吡啶 98%
CHK1 周期檢測點激1抗體3-吡啶 99%
CHK2 周期檢測點激2抗體4-吡啶 98%
Phospho-CHK2 (Thr68) 化周期檢測點激2抗體山梨 AR,99%
Chloramphenicol 霉抗體山梨 CP,99%
Gentamicin 慶大霉抗體山梨 分析標準品
Tetracycline 四環抗體山梨標準溶液 1.00mg/mL,體:純水