以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
商品介紹:
本試劑盒是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中caspase 8酶活性或純化的caspase 8酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時,除標準曲線外可以檢測20個樣品。 Caspase是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也稱FLICE、MACH或Mch5,有時被寫作caspase-8或caspase 8,通常以酶原的形式存在,在細胞凋亡的信號轉導過程中被激活。Caspase 8被認為是細胞凋亡信號轉導過程中比較上游的一個caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導的細胞凋亡過程中caspase 8被激活,形成一個由p18和p10組成的二聚體,進一步激活下游的caspase 4,caspase 6,caspase 9和caspase 10。 本Caspase 8活性檢測試劑盒是基于caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Aspp-nitroanilide)產生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過測定吸光度來檢測Caspase 8的活性。pNA在405nm附近有強吸收。 試劑盒中提供了caspase 8催化產生的黃色產物pNA,可以作為定量caspase 8酶活性的標準品。 試劑盒組分: 裂解液——————8ml 檢測緩沖液——————8ml Ac-IETD-pNA(2mM)———200μl pNA(10mM)——————200μl 儲存條件:-20℃。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
神經調節蛋白2(NRG2)英文名稱:NRG2 ELISA Kit腺苷激結構域蛋白1抗體包裝1g
神經調節蛋白1(NRG1)英文名稱:NRG1 ELISA Kit三磷腺苷結合盒轉運蛋白7抗體包裝250mg
神經特異性烯化(NSE)英文名稱:NSE ELISA Kit磷化鈉ATPα1多肽抗體包裝1g
神經肽Y(NP-Y)英文名稱:NP-Y ELISA KitNa+/K+-ATPase α1 鈉ATPα1抗體包裝5g
神經肽Y(NPY)英文名稱:NPY ELISA Kit肌動蛋白樣蛋白6B抗體包裝1g
神經絲蛋白L(NF-L)英文名稱:NF-L ELISA Kit脊髓小腦共濟失調蛋白7抗體包裝250mg
神經絲蛋白(NF)英文名稱:NF ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
神經生長因子前體(proNGF)英文名稱:proNGF ELISA Kitβ淀粉樣前體蛋白結合蛋白1抗體(X11α)包裝1g
神經生長因子(NGF)英文名稱:NGF ELISA Kit載脂蛋白E抗體包裝250mg
神經膠質纖維性蛋白(GFAP)英文名稱:GFAP ELISA Kit胎蛋白AFP抗體包裝5g
少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)英文名稱:OMgp-Ab ELISA Kit陰離子交換蛋白2抗體包裝100g
上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)英文名稱:ENA-78/CXCL5 ELISA Kit鐵調節蛋白1抗體包裝25g
山梨脫氫(SDH)英文名稱:SDH ELISA Kit三磷腺苷家族蛋白3A抗體包裝5g
沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)英文名稱:CT IgG ELISA Kit載脂蛋白J抗體包裝10g
色上皮衍生因子(PEDF)英文名稱:PEDF ELISA Kit載脂蛋白H抗體包裝2g
錨蛋白重復結構域蛋白20A1抗體糖化血紅蛋白(HbA1C)AT7519 HCl is a multi-CDK inhibitor for CDK1, 2, 4, 6 and 9 with IC50 of 10-210
Caspase 8 活性檢測試劑盒金黃紅色球 間氯扁桃酸白介素1α檢測試劑盒
釀酒酵母 N-甲氧羰基-L-叔亮氨酸白介素1β轉換酶檢測試劑盒
芽胞桿 磷酸二芐基酯白介素1家族成員10檢測試劑盒
釀酒酵母 3,5-二叔丁基-4-羥基苯甲白介素1可溶性受體Ⅱ檢測試劑盒
約氏乳桿 2-基-5-甲基吡啶白介素1受體相關激酶1檢測試劑盒
藤黃短小桿 2',3'-二-O-乙酰基-5'-脫氧-5-氟-D-胞啶白介素22結合蛋白檢測試劑盒
蘇云金芽胞桿櫪木亞種 4-(4-甲基哌)苯白介素23受體檢測試劑盒
南方鹽單胞 4-異基苯酸(含有數量不等的酸酐)白介素2受體檢測試劑盒
疣孢鏈霉 L-天門冬氨酸二乙酯鹽酸鹽白介素受體相關激酶檢測試劑盒
聚生殼 2,3,5-三氯吡啶白三烯B4檢測試劑盒
傳染性法氏囊病病 2-氨基-4-甲基噻唑白三烯B4受體1檢測試劑盒
青霉屬 -2-甲酸乙酯白三烯B5檢測試劑盒
水稻節桿 1-溴-4-乙基苯白三烯C4檢測試劑盒
暗黑鏈霉 2,4,5-三氟溴芐白三烯D4檢測試劑盒
挪威假絲酵母 對甲苯磺酰肼白三烯E4檢測試劑盒