詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
DiD | 10mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
長鏈二烷基羰花青化合物,特別是Dil,廣泛應用于固定和非固定的組織與細胞中,進行順行或逆行的神經示蹤分析。Dil 不會影響細胞的活力、生長以及基本生理特性。 Dil 標記運動神經元,可在培養基條件下持續跟蹤長達四周,在體內長達一年。染料通過在質膜中的緩慢橫向擴散均勻標記神經元,0.2~0.6mm/每天/固定標本,在活體組織里,可以達到6mm/每天。經過醛固定的組織,Dil 的擴增可以持續長達1~2 年。一般情況下未標記的染料不會向非標記的細胞轉移,除非質膜被破壞,比如切片部位。DiD(MW:959.91) 儲存:-20℃,避光,有效期12個月。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
蟾靈;蟾酥靈(標準品)英文名稱: 1,3-DihydroxynaphthaleneFMS樣酪激3配體抗體包裝250mg
長春里寧英文名稱: 1,4-3,6-Dianhydro-D-mannitol堿性成纖維生長因子9抗體包裝25g
長春新堿(標準品)英文名稱: 1,4-Cyclohexanedione原癌基因酪蛋白激FES抗體包裝100g
常春藤苷C(標準品)英文名稱: 1,4-Diaminoanthraquinone成纖維生長因子16抗體包裝25g
常春藤苷D英文名稱: 1,4-Dihydroxyanthraquinone成纖維激活蛋白α抗體包裝5g
常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷英文名稱: 1,5-DiaminonaphthaleneFas相關磷1抗體包裝1g
常春藤皂苷元(標準品)英文名稱: 1,5-Dihydroxynaphthalene葉受體4抗體包裝25g
常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷英文名稱: 1,6-DihydroxynaphthaleneWnt信號受體蛋白抗體包裝5g
常山(標準品)英文名稱: 1,8-Octanediol磷化載脂蛋白A1抗體包裝1g
巢脾(標準品)英文名稱: 1-Acetonaphthone磷化載脂蛋白A1抗體包裝25g
朝藿定A(標準品)英文名稱: 1-Adamantanol磷化堿性成纖維生長因子受體1抗體包裝5g
朝藿定A1(標準品)英文名稱: 1-Bromonaphthalene脂肪酰解1抗體包裝100g
朝藿定C(標準品)英文名稱: 1-Bromooctane外基質蛋白FRAS1抗體包裝25g
車前草(標準品)英文名稱: 1-Methylimidazole富馬合抗體包裝500g
車前草(車前)(標準品)英文名稱: 1-Ethylimidazole成纖維生長因子21抗體包裝5g
: IFO14900FRIBP2535ATCC33849資源名稱: 大腸埃希氏菌 質量規格:>98%生長分化因子-9試劑盒七葉樹皂苷B;Aesculuside B
膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質量規格:HPLC>98%,標準品生長分化因子3試劑盒8-去乙酰基滇烏堿;8-deacetyl
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格:>99%生長分化因子2試劑盒羥基吳茱萸堿;Hydroxyevodia
細胞膜紅色熒光染料(DiD)孔曲霉 2,3-二氮雜萘二肽基肽ⅥElisa
枯草芽孢桿枯草亞種 3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊烷-2-基)甲苯胸苷酸磷酸化Elisa
炭黑曲霉 (R)-(-)-3-喹寧外膜蛋白AElisa
蠟狀芽孢桿 二異苯(異構體混合物)精氨酸;絲氨酸豐富剪接因子1Elisa
弗氏檸檬酸 芐氧羰基-N-芐基-Beta-氨酸胸腎表達趨化因子Elisa
解脂復膜孢酵母(亞羅解脂酵母) 2-叔丁基環己基乙酸酯胱硫Elisa
鮑魚菇 反式4-甲基環己解脲支原體Elisa
粉紅單端孢霉 3-(3,4,5-氧基苯基)酸奈瑟Elisa
豬丹絲 雙(2,2,6,6-四甲基-4-基)癸二酸酯氮氧自由基磷酸絲氨酸Elisa
玉米大斑病 環磷酸羥基酮酸Elisa
厚垣孢普可尼亞 3-氟-4-氯苯乙3-磷酸甘油酸酯Elisa
米蘭農霉 3-氟-4-氯苯乙屋塵螨變應原Derp1 IgE抗體Elisa
墨西哥假黃色單胞 硫酸銨鋁,99.99%(metalsbasis)β-內酰Elisa
枯草芽孢桿 1-甲基-4-甲氧羰基吡唑-5-磺酰新型抑癌基因X連鎖凋亡抑制蛋白相關因子-1Elisa
細黃鏈霉 2-(2-氯苯氧基)酸乳酸脫氫Elisa