詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:SBI-0206965
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
SBI-0206965是一種強效,選擇性和細胞滲透性自噬激酶ULK1抑制劑,抑制ULK1和ULK2激酶活性,IC50值分別為108nM和711nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1884220-36-3 純度:98.04% 分子量:489.32 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
間型彎孢線粒體二羧載體蛋白抗體Anti-GLO1 Antibody纖維蛋白(FBL)
葡萄座腔菌類固受體激活蛋白1抗體Anti-GLI3 Antibody纖溶抑制因子(TAFI)
葡萄座腔菌S100A14/15抗體Anti-GLRX2 Antibody纖溶原激活物抑制因子2(PAI2)
大豆慢生根瘤菌組蛋白甲基轉移SMYD2抗體Anti-GLRX Antibody纖溶原激活物抑制因子1(PAI1)
加里福尼亞鏈霉菌沉默調節樣蛋白SirT7抗體Anti-GLRX2 Antibody纖溶/抗纖溶復合體(PAP)
大腸埃希氏菌沉默調節相關蛋白6抗體Anti-Glycine decarboxylase/GLDC Antibody纖溶(Fbn)
枯草芽孢桿菌磷化沉默調節相關蛋白6抗體Anti-GLRX3 Antibody仙掌(Cactin)
Pseudomonas torakense指轉錄因子Slug抗體Anti-GNAQ Antibody夏科雷登氏結晶蛋白(CLC)
粘質沙雷氏菌磷化腦質膜單轉運蛋白PMAT抗體Anti-GNB1 Antibody(PB1121)下丘泌受體2(HCRTR2)
枯草芽孢桿菌突觸蛋白6抗體Anti-Glypican 5/GPC5 Antibody下丘泌受體1(HCRTR1)
豌豆根瘤菌腦質膜單轉運蛋白PMAT抗體Anti-Glutaminase/GLS Antibody周期Y(CCNY)
馬德里青霉超氧化物歧化4抗體Anti-GNG11 Antibody周期T2(CCNT2)
大腸埃希氏菌可溶性載質轉運蛋白2B1抗體Anti-GNG2 Antibody周期T(CCNT)
松口蘑磷化外紡錘體樣蛋白1抗體Anti-GNG4 Antibody周期O(CCNO)
木賊鐮孢小跨膜糖化蛋白抗體Anti-GNS Antibody周期M4(CCNM4)
谷棒桿菌鈉通道蛋白10α抗體Anti-Golm1/GOLPH2 Antibody周期M3(CCNM3)
唾液結合免疫球蛋白樣凝集9抗體膨端青霉人腸靜脈內皮細胞
心血管調節肽Salusin-α抗體粟酒裂殖酵母人臍靜脈平滑肌細胞
絲/蘇激36融合同源蛋白抗體降短桿菌人臍靜脈內皮細胞
S100鈣結合蛋白A7抗體格氏李斯特氏菌人心肌成纖維細胞
自噬激酶ULK1抑制劑(SBI-0206965)釀酒酵母 鋰、鈉/Li, Na/2.0µg/ml ;、氨/K, NH3/200µg/ml粘蛋白5ACElisa
草酸青霉 銅、錳、鋅/Cu, Mn, Zn/100µg/ml ;鐵/Fe/500µg/ml血小板糖蛋白VElisa
雞傷寒沙門氏 鎘、鋅/Cd, Zn/10µg/ml ;銅/Cu/50µg/ml ;鉛/Pb/100µg/ml骨形成蛋白2Elisa
解脂亞羅酵母 砷、鎘、鉛/As, Cd, Pb/10µg/ml ;錳/ Mn/100µg/ml肌鈣蛋白IElisa
立枯絲核 鉻/Cr/0.5µg/ml ;釩、鋯/V, Zr/1.0µg/ml ;鋁、鈦/Al, Ti/10µg肌鈣蛋白TElisa
大腸埃希氏 鈣、、鎂、鈉/Ca, K, Mg, Na/5µg/ml ;鋁、鐵、鋅/Al, Fe, Zn/10µ谷氨酰合成Elisa
枯草芽孢桿 銅、錳、鋅/Cu, Mn, Zn/100µg/ml ;鐵/Fe /500µg/ml ;、鈣、鈉、鎂凝血因子XElisa
硫色鐮刀 鋇、銅、錳/Ba, Cu, Mn/5µg/ml ;鋰、硒、鋅/Li, Se, Zn/10µg/ml凝血因子ⅨElisa
蛋白原乳桿 鎘、鉻、硒/Cd, Cr, Se/1µg/ml ;砷、銅、錳、鎳、錢/As, Cu, Mn, Ni,酸性鞘磷脂Elisa
哈茨木霉 鋁、砷、鋇、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鎳、鉛、硒、鍶、鋅/Al, As, Ba, Cd, Co, Cr玉米赤霉烯酮Elisa
棲藻海卵 砷、鋇、鎘、鉻、銅、鐵、鎂、錳、鎳、鋅/As, Ba, Cd, Cr, Cu, Fe, Mg, Mn觸珠蛋白Elisa
楊盤二孢* 鋁、砷、、鋇、鈹、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、硒、錫、鈦、、釩、鋅、鋯/Al, As過氧化氫Elisa
蟹味菇(白) 鋁、砷、、鋇、鈹、鎘、鈷、鉻、銅、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、硒、錫、鈦、、釩、鋅、鋯/Al, AsIII型前膠原Elisa
枯草芽孢桿 鋇、鍶、/Ba, Sr, Tl /50µg/ml ;鋁、砷、、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、IV型膠原Elisa
大腸桿 鋇/Ba/1600µg/ml ;鍶/Sr/600µg/ml ;鈣/Ca/400µg/ml ;鎂/Mg羥脯氨酸Elisa