詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:Z-IETD-FMK
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
Z-IETD-FMK是選擇性和細胞可滲透的胱天蛋白酶(caspase8)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:210344-98-2 純度:98.0% 分子量:654.68 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Acinetobacter soli Kim et al. 鋅指轉錄蛋白Sall1抗體Anti-GH1 Antibody腺苷A2b受體(ADORA2b)
擬枝孢鐮孢鋅指轉錄蛋白Sall4抗體Anti-GFRA1 Antibody腺苷A2a受體(ADORA2a)
魯考弗美奇酵母轉錄因子SOX17抗體Anti-GH1 Antibody線粒體轉錄因子A(TFAM)
蜥蜴纖細芽孢桿菌溴化太林相關蛋白2抗體Anti-GH1 Antibody線粒體乙脫氫(ALDM)
濕鏈霉菌S100鈣結合蛋白A8抗體Anti-GHR Antibody線粒體外膜轉位70A(TOMM70A)
黃曲霉唾液結合性免疫球蛋白樣凝集抗體Anti-GILT/IFI30 Antibody線粒體鐵蛋白(MFRN)
冷溫木拉克酵母唾液結合性免疫球蛋白樣凝集1抗體Anti-GHR Antibody線粒體鐵蛋白(FTMT)
枯草芽孢桿菌轉錄因子SP3抗體Anti-GILT/IFI30 Antibody線粒體融合2(MFN2)
香菇轉錄因子SP6抗體Anti-GIP Antibody線粒體融合1(MFN1)
PaenibacillusSPOP蛋白抗體Anti-GIP Antibody線粒體解偶聯蛋白2(UCP2)
污黑腐皮殼鈉離子/牛磺膽共轉運蛋白抗體Anti-GJA1 Antibody線粒體解偶聯蛋白1(UCP1)
糖化酵母生長抑14抗體Anti-GJA4 Antibody線粒體肌激1B(CKMT1B)
根白蟻傘碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4抗體Anti-GJA3 Antibody線粒體肌激1A(CKMT1A)
匍枝根霉原變種肺表面活性蛋白D抗體Anti-GJA1 Antibody線粒體甘油-3-磷酰基轉移(GPAM)
斷裂諾卡氏菌血影蛋白A鏈紅型抗體Anti-GJB1 Antibody線粒體超氧化物歧化(SOD2)
蕈狀芽孢桿菌分選連接蛋白5抗體Anti-GJA5 Antibody線粒體GTP1(MTG1)
抑基因SSDP2抗體刺囊毛霉人支氣管平滑肌細胞
鯊烯環氧抗體休哈塔假絲酵母休哈塔亞種人直腸平滑肌細胞
信號轉導和轉錄激活因子5b抗體棘孢木霉人小腸平滑肌細胞
同源轉錄調節蛋白Sin3A抗體長枝木霉人結腸平滑肌細胞
caspase8抑制劑(Z-IETD-FMK)黑曲霉 N-(9-芴甲氧羰基)-L-賴氨酸鹽酸鹽圓環病Ⅱ型Cap蛋白Elisa
鮑魚側耳 十四烷基二化銨胍基乙酸N-甲基轉移Elisa
謝瓦曲霉 1-乙酰哌精氨酸-甘氨酸脒基轉移Elisa
蘇云金芽孢桿 氨磺酸胍基乙酸N-甲基轉移Elisa
中間氣單胞 白屈氨酸水合物精氨酸-甘氨酸脒基轉移Elisa
釀酒酵母 對羧基苯磺酰粘蛋白5BElisa
盤孢屬 乙酰氧基乙酰戊型肝炎病抗體Elisa
斑褶菇* 炔酸叔丁酯賈地鞭毛蟲抗體Elisa
奧氏蜜環 3-苯氧芐隱孢子蟲抗體Elisa
暗褐色毛霉 苯基基化銨芽囊原蟲抗體Elisa
巨大芽孢桿 A 四鈀酸鈉流行性腹瀉病sIgA抗體Elisa
泰國考克娃酵母 原戊酸酯傳染性胃腸炎病sIgA抗體Elisa
地衣芽孢桿 D-(-)-二乙酯輪狀病sIgA抗體Elisa
枯草芽孢桿 3,3,5,5-四二苯二硫白介1β前體Elisa
三葉草根瘤 Boc-L-賴氨酸白介18前體Elisa