詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Venetoclax(ABT-199) | 5mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Venetoclax又稱為ABT-199、GDC-0199,強效的、選擇性的抑制Bcl-2(Ki<0.01 nM),比作用于Bcl-xL和Bcl-w選擇性高4800倍以上。Venetoclax抑制Bcl-2依賴的細胞生長,并抑制體內移植瘤生長。Venetoclax表現出抗白血病活性。 【該產品僅用于科研實驗,不能用于人體】 靶點:Bcl-2 外觀:粉末 純度:≥98% 溶解性:溶于DMSO(50 mg/ml) 儲存條件:-20℃,有效期24個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
甘露聚糖結合凝集關聯絲蛋白1(MASP1)英文名稱:MASP1 ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝1g
甘脫氫(GLDC)英文名稱:GLDC ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝25g
鈣網蛋白(CRT)英文名稱:CRT ELISA Kit磷化CREB-1抗體包裝5g
鈣離子轉運ATPB2(ATP2B2)英文名稱:ATP2B2 ELISA Kit磷化粒-巨噬集落激因子受體β抗體包裝1g
鈣離子轉運ATPA2(ATP2A2)英文名稱:ATP2A2 ELISA Kit磷化N-鈣粘附分子抗體包裝25g
鈣非依賴性磷脂A2(iPLA2)英文名稱:iPLA2 ELISA Kit磷化后期促進復合蛋白3抗體包裝5g
鈣蛋白抑制蛋白(CAST)英文名稱:CAST ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝100g
鈣蛋白10(CAPN10)英文名稱:CAPN10 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝25g
鈣蛋白1(CAPN1)英文名稱:CAPN1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框75抗體包裝25ml
復制啟動因子1(REPIN1)英文名稱:REPIN1 ELISA KitCD4抗體包裝5ml
輔肌動蛋白α2(ACTN2)英文名稱:ACTN2 ELISA Kit血小板糖蛋白GPIb抗體包裝1g
封閉蛋白3(CLDN3)英文名稱:CLDN3 ELISA Kit蛋白精N基4抗體包裝1g
封閉蛋白2(CLDN2)英文名稱:CLDN2 ELISA Kit磷化蛋白精N基4抗體包裝25g
分泌性白細胞蛋白抑制因子(SLPI)英文名稱:SLPI ELISA Kit磷化周期依賴性激6抗體包裝5g
分泌型卷曲相關蛋白5(SFRP5)英文名稱:SFRP5 ELISA Kit磷化原癌基因CBL2抗體包裝100mg
細鏈格孢Alternaria│tenuis Nees 質量規格:>98%,標準品載脂蛋白A4試劑盒遠華蟾蜍精;ocinobufagi
小孢根霉華變種Rhizopus│microsporus var. chinensis 質量規格:含量>99.0%,無載脂蛋白A2試劑盒氧化槐定堿;Oxysophoridine
香菇Lentinula│edodes 質量規格:HPLC>99%,標準品載脂蛋白A1試劑盒薏苡;Coixol
Bcl-2抑制劑(GDC-0199)畢赤酵母 (R)-3-(3-甲基丁酰)-4-芐基-2-惡唑烷酮CCDC49抗體Elisa
解淀粉芽孢桿 2-羥甲基噻唑天門冬氨酸氨基轉移Elisa
冠突曲霉 5-噻唑甲酸甲酯葡萄糖轉運蛋白4Elisa
廈門交替紅色桿 噻唑-4-羧酸乙酯型肝炎病IgM抗體Elisa
喜濕小脆柄菇 5-溴-2-(溴甲基)吡啶早孕因子蛋白Elisa
粘紅酵母 2-基噻唑巨噬炎性蛋白Elisa
根瘤 2,2’-硫代雙(對叔辛基苯酚)鎳-正丁絡合物布魯氏IgG抗體Elisa
美澳型核果褐腐病 五羰基溴化錳(I)布魯氏IgM抗體Elisa
節桿 N-(5-氯-2-吡啶基)雙(三氟磺酰亞)α-N-乙酰基半乳糖苷Elisa
魯氏毛霉 Fmoc-L-天冬氨酸 4-甲酯維生D結合蛋白Elisa
空泡單胞 5-氧基-4-甲基-1,2,4-三唑啉酮四旋蛋白1Elisa
狹窄革 2,6-二氟-3-甲氧基苯小亞基鈣蛋白2Elisa
梨生殼囊孢 4-氯-3,5-二氟苯小亞基鈣蛋白1Elisa
米曲霉 3-氯肉桂酸半胱氨酸蛋白抑制劑4Elisa
潘諾尼亞鎖霉 4-(1-羥基-1-甲基乙基)-2-基-1H-咪唑-5-羧酸乙酯凝血因子XIII A1Elisa