詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)
英文名稱:DNA Ligase IV Inhibitor
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:DNA Ligase IV Inhibitor 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg SCR7是一種DNA連接酶IV(DNA Ligase IV)抑制劑,抑制非同源末端連接(NHEJ)。SCR7增強CRISPR/Cas9條件的編輯頻率。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1533426-72-0 純度:99.78% 分子量:334.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
金黃殼囊孢4號染色體開放閱讀框51抗體Human SMOX(Spermine oxidase) ELISA Kit人結核菌桿(TB)抗體(IgA)免疫試劑盒
海角副球菌分支GBE1抗體Human AMOT(Angiomotin) ELISA Kit人結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
擬莖點霉磷化絲切蛋白抗體Human CASP7(Caspase-7) ELISA Kit人結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)免疫試劑盒
平田頭菇補體成分5受體1抗體Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) ELISA Kit人結蛋白(DES)抗體免疫試劑盒
廣島鏈霉菌分裂周期2樣蛋白激6抗體Human HSD11B1(Corticosteroid 11-beta-dehydrogenase isozyme 1) ELISA Kit人結蛋白(Des)免疫試劑盒
硬結節桿菌補體C3IP1抗體Human SEMA3A(Semaphorin-3A) ELISA Kit人角化生長因子(KGF)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌磷化周期檢測點激2抗體Human HRG(Histidine-rich glycoprotein) ELISA Kit人角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)免疫試劑盒
異常漢遜酵母變種周期依賴性激11抗體Human SMOX(Spermine oxidase) ELISA Kit人膠轉蛋白(TAGLN)免疫試劑盒
芬娜冬菇周期依賴性激10Human SSTR2(Somatostatin receptor type 2) ELISA Kit人膠質系來源的神經營養因子(GDNF)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌枯草亞種8號染色體開放閱讀框86抗體Human CASP7(Caspase-7) ELISA Kit人膠原吡啶交聯(PYD)免疫試劑盒
特異青霉(產黃青霉)磷化分裂周期蛋白25B抗體Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) ELISA Kit人降脂(Adipsin)免疫試劑盒
血痕韌革菌磷化分裂周期蛋白25B抗體Human AMOT(Angiomotin) ELISA Kit人降鈣原(PCT)免疫試劑盒
鹽古桿菌磷化半胱蛋白蛋白6抗體Human APLN(Apelin) ELISA Kit人降鈣基因相關肽(CGRP)免疫試劑盒
高盧蜜環菌9號染色體開放閱讀框172抗體Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit人降鈣(CT)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit人堿性胎兒蛋白(BFP)免疫試劑盒
發酵成對桿菌表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit人堿性磷(ALP)免疫試劑盒
冷海黃桿菌Flavobacterium│frigidimaris 質量規格:AR白皮杉;
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:AR紫草呋喃A
外來毛霉Mucor│adventitius 質量規格:IND光萼野百合堿;烏沙拉明 光萼豬屎豆堿;
DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)樹舌 1,3-二-4,6-二c-fosElisa
冷彎曲 2,4-二羰基庚酸乙酯S100鈣結合蛋白A8復合物Elisa
釀酒酵母 3-溴-4-羥基吡啶磷脂酰Elisa
擲孢酵母 4-溴-2-羥基吡啶酸性磷酸Elisa
玫煙色擬青霉(10個工作日) 2-氟-4-鎖鏈Elisa
黃曲霉 九氟丁基磺酸酐酮體Elisa
赤霉屬 4-(三氟甲基)苯肼隱熱蛋白Elisa
葫蘆小叢殼 釷試劑羥脯氨酸Elisa
釀酒酵母 3-氨基烷磺酸Ⅱ型前膠原羧基端肽Elisa
枯草芽孢桿 1-[3,5-雙(三氟甲基)苯基]乙12S-羥化二十碳四烯酸Elisa
長白山傘枝霉 2-溴喹喔啉結核桿Elisa
巨大芽孢桿 3,5-二氨基三氟甲苯γ氨基丁酸轉氨Elisa
放射形根瘤 三乙基氧四氟酸抗內膜抗體Elisa
阿魏側耳-天山2號 三乙基氧四氟酸前列腺酸性磷酸Elisa
淡紫擬青霉 異魯米諾可溶性生激表達基因2蛋白Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)