改良Lillie-Mayer蘇木素染色液公司*的產(chǎn)品：eIF2 alpha/FITC 熒光標(biāo)記真核啟動(dòng)因子2α抗體IgG硅酮 DC-550 GC
eIF4E/FITC 熒光標(biāo)記真核翻譯起始因子4E抗體IgG磺醋酰 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-eIF4E(pSer209)/FITC 熒光標(biāo)記化eIF-4E（Ser209）抗體IgG磺吡 分析標(biāo)準(zhǔn)品
HBA1/Gold 金標(biāo)記抗人血紅蛋白

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：改良Lillie-Mayer蘇木素染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100ml|500ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

升麻（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Panaxadiol肌收縮蛋白MYOT抗體包裝25g

升麻苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Panaxatriol磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體包裝5g

升麻-3-O-α-L-拉伯糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Compound K環(huán)指蛋白59抗體包裝25g

生脈提取物（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside F1磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體包裝5g

勝紅薊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside F2羥戊激抗體包裝5g

圣草次苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside Rb1羥戊脫羧抗體包裝1g

圣草酚(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside Rb2胞漿蘋果1抗體包裝5g

蓍草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside Rb3組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體包裝1g

十七碳酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside Rc微絲相關(guān)蛋白3樣抗體包裝250mg

石菖蒲（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside Rd微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白包裝100g

石吊蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gliquidone單酰甘油脂肪抗體包裝25g

石吊蘭英文名稱： Gliquidone致癌基因n-Myc抗體包裝25g

石斛酚（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside Rf多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體包裝5g

石斛堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ginsenoside Rg1線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體包裝1g

石見穿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 20(R)Ginsenoside Rg2蛋白激MST2抗體包裝25g

KCTC22802=CCUG58402資源名稱: 海黃桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于培養(yǎng)抗SSB/La抗體丁香油;Clove oil

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗SS-A/Ro抗體大黃酚;Chrysophanol;Chr

: AS2.1386資源名稱: 熱帶假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR抗SSA/Ro抗體 大豆苷元;Daidzein
改良Lillie-Mayer蘇木素染色液乳酸乳球乳亞種 1-（二苯基）哌基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1Elisa

葡萄座腔屬 環(huán)酸乙酯基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2Elisa

大腸埃希 3,3'-二甲腺原氨酸基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3Elisa

產(chǎn)氣列契瓦尼爾氏 對氟苯甲基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4Elisa

大腸埃希 6-氟-3-(4-基)-1,2-苯并異噁唑鹽酸鹽基質(zhì)衍生因子1Elisa

芬尼青霉 1-乙基-4-氟苯基質(zhì)衍生因子1αElisa

云芝栓孔（變色栓） 2,3,4-三氟苯基質(zhì)相互作用分子1Elisa

枝孢屬 3-氟肉桂酸激活A(yù)Elisa

鏈霉 1-(4-甲氧基苯基)哌鹽酸鹽激活BElisa

釀酒酵母 3-(3-氟苯基)酸低密度脂蛋白Elisa

宇佐美曲霉 3-氟-4-羥基幾丁質(zhì)3Elisa

有柄樹舌靈芝(白芝) 間氟苯乙?guī)锥≠|(zhì)3樣蛋白3Elisa

異常漢遜酵母 4,7-雙(5-溴-4-辛基噻吩-2-基) 苯并[c][1,2,5]噻二唑己糖激Elisa

葡萄座腔 二喹啉酸己糖激2Elisa

枯草芽孢桿 1-(3-氨基)-4-甲基哌甲胎蛋白Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)