詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
2×10ml|2×20ml | 1~3天 |
商品介紹:
用途: 過氧化物酶酶染色 注意事項: 主要由固定液、WG-KI溶液等組成,混合后使用。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
商陸皂苷T英文名稱: Esculin磷化肌球蛋白輕鏈抗體包裝5g
商陸皂苷(標準品)英文名稱: Fraxetin肌肉特異性泛蛋白連接1抗體包裝1g
商陸皂苷辛英文名稱: 6,7-Dihydroxycoumarin泛蛋白連接抗體包裝25g
芍藥苷(標準品)英文名稱: 6,7-Dihydroxycoumarin單羧轉運蛋白2抗體包裝5g
芍藥內酯苷(標準品)英文名稱: Solanesol可溶性蘋果脫氫抗體包裝1g
蛇床子(標準品)英文名稱: Hesperitin蛋白激C亞性D型抗體包裝1g
蛇床子(標準品)英文名稱: Qingyangshengenin A磷化µ-型阿片受體抗體包裝5g
蛇膽汁(標準品)英文名稱: Qingyangshengenin B磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體包裝1g
射干(標準品)英文名稱: 4'-Demethylepipodophyllotoxin基質金屬蛋白9抗體包裝250mg
麝香(標準品)英文名稱: Demethoxycurcumin染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體包裝1g
伸筋草(標準品)英文名稱: Norisoboldine單羧轉運蛋白-1抗體包裝25g
腎茶(標準品)英文名稱: Dehydrodiisoeugenol線粒體核糖體蛋白L11抗體包裝5g
升麻(興安升麻)(標準品)英文名稱: Corynoxeine促血管平滑肌分化因子抗體包裝1g
升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標準品)英文名稱: Dehydrocostus Lactone跨膜結構域4亞家族成員2抗體包裝250mg
升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: Genistin磷化致癌基因C-Myc抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:培養級,效價≥180IU/mg抗U1小核核糖核蛋白70kDa試劑盒對葉百部堿;Tuberostemonin
黃土根瘤菌Rhizobium│plateaum 質量規格:BR,>98%,藥用級抗TNF-α自身抗體東莨菪內酯;Scopoletin
青霉屬Penicillium│sp. 質量規格:>99%,CP抗SS-B/La抗體丁香;Syringic acid
過氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)泡囊側耳(鮑魚菇) 4-硝基-2H-1,2,3-三唑活性氧簇Elisa
串珠鐮孢 N-鄰苯二甲酰甘氨酸肌鈣蛋白ⅠElisa
紡錘形賴氨酸芽孢桿 5-硝基靛紅酸酐肌鈣蛋白TElisa
副豬嗜血桿 1,1'-雙(4-羥基苯基)環己烷;雙酚Z肌酐Elisa
棘孢小單胞 3-氨基-3-(4-甲氧基苯基)酸肌骨Elisa
盤長孢狀盤孢 4-甲基水楊酸甲酯肌紅蛋白Elisa
盤長孢狀盤孢 吡啶-3,4-二甲酸酐肌酸激Elisa
植物乳桿 N-Boc-4-氧代-L-脯氨酸心肌型肌酸激同工MBElisa
植物類諾卡氏 1-苯基-2-吡咯烷酮肌酸激同工MMElisa
短密青霉 1,3-二甲基-4-酮基質金屬蛋白1Elisa
大腸埃希氏桿 3-(4-酰基)酸基質金屬蛋白13Elisa
香菇 3'--5'-氟苯乙酮基質金屬蛋白2Elisa
擴散炭層 (5-溴-2-)(4-乙氧苯基)甲酮基質金屬蛋白3Elisa
毛栓孔 5-溴-2--4'-乙氧基二苯基質金屬蛋白4Elisa
泡囊短波單胞 3-甲基質金屬蛋白9Elisa