公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:p53抑制劑(PFT-α)
英文名稱:Pifithrin-α
產(chǎn)品規(guī)格:5mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Pifithrin-α (PFT--α) 是一種常用的p53抑制劑,可逆性抑制p53依賴性的基因轉(zhuǎn)錄活性如細(xì)胞周期蛋白 G、p21/waf1/cipl 和 mdm2蛋白的表達(dá)。Pifithrin-α不僅抑制p53介導(dǎo)的由細(xì)胞毒素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,還能抑制DNA損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。Pifithrin-α作用于海馬細(xì)胞,并降低p53-DNA結(jié)合活性水平、抑制caspase活化。Pifithrin-α誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻斷,并顯著降低DNA合成。另外,與放射性共同處理癌癥時(shí),Pifithrin-α?xí)p輕或放射性對正常組織的副作用。 靶點(diǎn):p53 外觀:淺白色粉末 純度:≥95% 溶解性:溶于DMSO 儲存條件:-20℃,有效期24個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
干擾α(IFNα)英文名稱:IFNα ELISA Kit半胱蛋白抑制劑6抗體包裝5g
肝脂(LIPC)英文名稱:LIPC ELISA Kit碳酐相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體包裝1g
肝再生擴(kuò)展生長因子(GFER)英文名稱:GFER ELISA Kit白介-18受體α鏈抗體包裝5g
肝(HPA)英文名稱:HPA ELISA Kit轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體包裝1g
肝結(jié)合性表皮生長因子(HBEGF)英文名稱:HBEGF ELISA KitT淋巴CD1抗體包裝25g
肝輔因子Ⅱ(HCⅡ)英文名稱:HCⅡ ELISA Kit磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體包裝5g
肝腎骨堿性磷(ALPL)英文名稱:ALPL ELISA Kit網(wǎng)格蛋白重鏈抗體包裝1g
肝配蛋白B受體3(EPHB3)英文名稱:EPHB3 ELISA Kit透明質(zhì)介導(dǎo)游走受體抗體包裝100g
肝配蛋白B2(EFNB2)英文名稱:EFNB2 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框24抗體包裝1g
肝癌源性生長因子(HDGF)英文名稱:HDGF ELISA Kit2號染色體開放閱讀框60抗體包裝250mg
肝X受體α(LXRα)英文名稱:LXRα ELISA Kit磷化周期依賴性激7抗體包裝25g
甘油醛-3-磷脫氫(GAPDH)英文名稱:GAPDH ELISA Kit磷化周期依賴性激9抗體包裝5g
甘露糖受體C2(MRC2)英文名稱:MRC2 ELISA Kit磷化周期檢測點(diǎn)激1抗體包裝5g
甘露糖受體C1(MRC1)英文名稱:MRC1 ELISA Kit磷化周期檢測點(diǎn)激1抗體包裝1g
甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)英文名稱:MBL ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝250mg
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,培養(yǎng)級載脂蛋白B48試劑盒原七葉皂苷元;Protoaescigen
植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白B100試劑盒鹽;EMetine Hydroc
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于培養(yǎng)載脂蛋白A5試劑盒乙氧基血根堿;Ethoxysanguin
p53抑制劑(PFT-α)大腸埃希 阿卡他定白抗原B27Elisa
巨大芽孢桿 4-咪唑類白抗原B1502Elisa
地衣芽胞桿 3-苯基芐基溴抗RNA聚合III抗體Elisa
謝瓦曲霉 Nα-Fmoc-Nε-生物-L-賴氨酸還原型輔ⅠElisa
草假單胞 Y-27632信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子4Elisa
弗氏鏈霉 [4-(反-4-N-基環(huán)己基)苯基]甲型肝炎病IgM抗體Elisa
木菇屬 1-Boc-3-戊型肝炎病IgM抗體Elisa
瓜果腐霉 六硝基鈷(III)酸鈉幽門螺桿抗體Elisa
釀酒酵母 四苯基卟啉鎂幽門螺桿抗原Elisa
優(yōu)美氈被 Cy5-N-羥基琥珀酰亞酯黃熱病抗原Elisa
黃色孢鏈霉 Cy5黃熱病IgG抗體Elisa
克羅諾桿屬 N-BOC-4-氧代-3-吡咯烷甲酸乙酯凋亡相關(guān)蛋白TFAR19Elisa
嗜熱側(cè)孢霉 鹽酸噻加賓抗鼠抗體Elisa
羅倫隱球酵母 5-溴-1,3-二氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯流行性腦膜炎球抗原Elisa
開菲爾乳桿 二氯二羰基雙(三苯基膦)釕(II)圍脂滴蛋白Elisa